Sínteses de novas sondas fosforescentes de oxigênio e sua avaliação por espectroscopia e microscopia de imageamento de tempo de vida de fosforescência em cultura de células

• Processo: 19/22578-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 16 de dezembro de 2019
• Data de Término da vigência: 15 de dezembro de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Celio Pasquini
• Beneficiário: Rafael Di Lazaro Gaspar
• Supervisor: Dmitri Papkovsky
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University College Cork (UCC), Irlanda
• Vinculado à bolsa: 18/20997-3 - Desenvolvimento de sensores ópticos de oxigênio e temperatura baseados em complexos de íons lantanídeos emissores no visível e infravermelho, BP.PD
• Assunto(s): Sensores ópticos Fosforescência Porfirinas Imageamento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cell imaging | Oxygen sensor | phosphorescence | Plim | PtTFPP | Instrumentação e desenvolvimento de sensores ópticos de oxigênio intracelular

Resumo

O projeto de pesquisa tem por objetivo o desenvolvimento de novas sondas de oxigênio baseadas na porfirina PtPFPP, apresentando penetração e coloração aprimorada em cultura de células, particularmente para o uso em microscopia de imageamento de tempo de vida de fosforescência (PLIM). As novas sondas ópticas de oxigênio serão sintetizadas utilizando a reação de click chemistry para a modificação do composto PtPFPP, resultando em derivados com cadeias de polietilenoglicol monofuncionalizadas com grupos NH2, com posterior conversão a derivados contendo grupos reativos N-hidroxisuccinimido e maleimido que serão reagidos com proteínas, como por exemplo albumina bovina, transferrina e anticorpos monoclonais ( anti-Glut1 e mAb). As caracterizações estruturais e fotofísica dos intermediários e dos bioconjugados serão realizadas, assim como testes em cultura de células de mamíferos para avaliar o desempenho de coloração e sensoriamento de oxigênio. As imagens de oxigênio serão obtidas por meio de microscopia confocal e de campo amplo PLIM. O desenvolvimento do plano de atividades irá perseguir uma nova abordagem para aquisição de imagens de oxigênio de alta performance, pela combinação de sondas de oxigênio que apresentam entrega dirigida e seletiva com avançada detecção PLIM de oxigênio celular, abordando as desvantagens inerentes as sondas de oxigênio atualmente utilizadas e aos sistemas de microscopia PLIM, facilitando o seu uso em análises de cultura de célula e de tecidos. (AU)