Análise multiômica (RNAseq e ATACseq) em núcleos celulares únicos do hipotálamo de camundongas durante a gestação normal e pré-eclâmptica

• Processo: 21/14426-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Andre de Souza Mecawi
• Beneficiário: Victor Jardim Duque
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/27581-0 - Controle da secreção de vasopressina na gestação e suas implicações na fisiopatologia da Pré-Eclâmpsia, AP.JP
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/14265-0 - Atlas transcriptômico multiespécies de células únicas do hipotálamo: Avaliando as vias evolutivas dos neurônios peptidérgicos, BE.EP.DD
• Assunto(s): Neuroendocrinologia Pré-eclâmpsia Hipotálamo Vasopressinas Gravidez Modelos animais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ATACseq | gestação | Hipotálamo | Pré-eclâmpsia | RNAseq | vasopressina | Neuroendocrinologia

Resumo

A gestação é um período de mudanças extremas na fisiologia da fêmea, adaptando o organismo da mãe para garantir o desenvolvimento saudável do embrião/feto. A pré-eclâmpsia (PE) é uma doença característica da gestação e definida pelo desenvolvimento de hipertensão na segunda metade da gestação, associada à proteinúria e/ou disfunção de órgãos-alvo. Ela afeta entre 3 e 5% das gestantes no mundo e 8% nas regiões mais pobres do Brasil, sendo uma das principais causa de morte maternofetais. Há muito se sabe que ocorre a redução do limiar osmótico para ativação dos neurôniosprodutores de vasopressina (AVP) durante a gestação, mas apenas nessa década a hipersecreção deste hormônio vasoativo foi implicada na indução da PE. Apesar deste achado recente, os mecanismos responsáveis pelo aumento da secreção de AVP e consequente indução da PE não são conhecidos. Este projeto tem como objetivo geral estudar os mecanismos responsáveis pela alteração da osmossensibilidade dos neurônios produtores de AVP na gestação, bem como entender as consequências de sua hipersecreção para o desenvolvimento da PE. Iremos aplicar a técnica de sequenciamento do RNA e das regiões descompactadas da cromatina (ATACseq) em núcleos únicos de células do hipotálamo para identificar novos genes reguladores da secreção exacerbada de AVP durante a gestação e sua participação no desenvolvimento da préeclâmpsia. Após a identificação dos genes candidatos e validação da alteração de sua expressão aos níveis de mRNA e proteína, utilizaremos a tecnologia Cre-loxP para deletar ao menos um destes nos neurônios produtores de AVP, possibilitando avaliar sua implicação no processo de síntese-excitação-secreção de AVP durante a gestação fisiológica e pré-eclâmptica. Esperamos assim, contribuir para o entendimento das alterações da secreção de AVP durante a gestação e sua implicação na indução da PE, possibilitando o desenvolvimento de novas estratégias para prevenção, diagnósticos e tratamento dessa doença. (AU)