Avaliação da taxa de transcrito dos genes ITGA3 e ITGB1 após overload de albumina em podócitos in vitro

• Processo: 22/03950-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2022
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2022
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mara Sanches Guaragna
• Beneficiário: Jackeline Pitonbeira da Silva
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Nefrologia Proteinuria Podócitos Alvo terapêutico Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cultura celular podócitos | ITGA3 e ITGB1 | overload de albumina | Podocitopatias | Proteinúria | recuperação de fenótipo | Nefrologia

Resumo

A presença de proteinúria persistente é o sinal mais sugestivo de doença glomerular e do desenvolvimento de Doença Renal Crônica (DRC) constituindo um importante marcador prognóstico para esta condição. Na lesão glomerular, a principal proteína presente na urina é a albumina. Neste caso, a albuminúria decorre do comprometimento da barreira de filtração glomerular, podendo se associar a lesão dos podócitos. Os podócitos são células altamente especializadas e diferenciadas, cujos prolongamentos, os pedicelos, são extremamente importantes no processo de filtração e são divididos em três domínios: apical da membrana (AMD), diafragma de fenda (do inglês, slit diaphragm - SD) e basal da membrana (BMD). Danos em quaisquer destes domínios levam a uma resposta característica, o "effacement", o que leva à albuminúria progressiva. No entanto, ainda existem controvérsias em relação ao impacto da proteinúria para o agravamento do "effacement" nas podocitopatias. Existem alguns estudos na literatura avaliando o impacto do overload de albumina em cultura celular de podócitos in vitro, os quais demonstram alterações em vias relacionadas à inflamação, apoptose, proliferação, diferenciação celular e rearranjo do citoesqueleto. Apesar de terem alcançado bons resultados, ainda não esclarecem de forma definitiva as consequências moleculares do overload de albumina. Não foi verificado se ocorreria recuperação do fenótipo após retirada abrupta ou gradual da albumina. Ainda, a avaliação do efeito de albumina foi realizada somente em podócitos sem dano prévio. Não existem estudos da avaliação da expressão e adesão da integrina ±3²1, codificada pelos genes ITGA3 e ITGB1 - proteína fundamental para a sinalização e integração do domínio basal com o citoesqueleto dos podócitos - após overload de albumina em podócitos in vitro. Portanto, o objetivo do presente trabalho é avaliar se há diferença de expressão dos genes ITGA3 e ITGB1 frente ao overload progressivo de albumina em podócitos in vitro, sem e com exposição prévia à droga nefrotóxica puromicina aminoglicosídeo (PAN), bem como avaliar a adesão dos podócitos frente às mesmas condições. Se houver alteração na expressão, será realizada a regressão do overload para verificar se ocorre recuperação do fenótipo. É importante salientar que o avanço do conhecimento de vias moleculares específicas poderia permitir a identificação de potenciais alvos terapêuticos para condições de caráter geral ou específico. Se bem-sucedidos, tais estudos futuros poderiam propor a utilização de intervenções capazes de minimizar os efeitos renais deletérios da albumina, contribuindo para a desaceleração da progressão da DRC em muitos pacientes.(AU)