Avaliação da taxa de transcrito do gene CD2AP após overload de albumina em podócitos in vitro

• Processo: 22/03907-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2022
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2023
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mara Sanches Guaragna
• Beneficiário: José Ronaldo Alves Troleze
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Nefrologia Insuficiência renal crônica Albuminas Proteinuria Podócitos Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cd2Ap | cultura celular podócitos | overload de albumina | Podocitopatias | Proteinúria | recuperação de fenótipo | Nefrologia

Resumo

A presença de proteinúria persistente é o sinal mais sugestivo de doença glomerular e do desenvolvimento de doença renal crônica (DRC) constituindo um importante marcador prognóstico para esta condição. Na lesão glomerular, a principal proteína presente na urina é a albumina. Neste caso, a albuminúria decorre do comprometimento da barreira de filtração glomerular, podendo se associar a lesão dos podócitos. Os podócitos são células altamente especializadas e diferenciadas, cujos prolongamentos, os pedicelos, são extremamente importantes no processo de filtração e são divididos em três domínios: apical da membrana (AMD), diafragma de fenda (do inglês, slit diaphragm - SD) e basal da membrana (BMD). Danos em quaisquer destes domínios levam a uma resposta característica, o "effacement", o que leva à albuminúria progressiva. No entanto, ainda existem controvérsias em relação ao impacto da proteinúria para o agravamento do "effacement" nas podocitopatias. Existem alguns estudos na literatura avaliando o impacto do overload de albumina em cultura celular de podócitos in vitro, os quais demonstram alterações em vias relacionadas à inflamação, apoptose, proliferação, diferenciação celular e rearranjo do citoesqueleto. Apesar de terem alcançado bons resultados, ainda não esclarecem de forma definitiva as consequências moleculares do overload de albumina. Diversas proteínas estão envolvidas na manutenção da estrutura e da função do podócito e podem afetar o rearranjo do citoesqueleto de actina, entre elas a proteina adaptadora CD2AP no domínio SD. Existem dados na literatura demonstrando o "down-regulation" de CD2AP após overload de albumina em podócitos murinos in vitro. No entanto, não foi verificado se ocorreria recuperação do fenótipo após retirada abrupta ou gradual da albumina. Ainda, a avaliação do efeito de albumina foi realizada somente em podócitos sem dano prévio. Desta forma, o objetivo do presente trabalho é avaliar se há diferença de expressão do gene CD2AP frente ao overload progressivo de albumina em podócitos humanos in vitro, e, se houver alteração, será realizada a regressão do overload para verificar a recuperação do fenótipo. Também será realizada a avaliação do efeito do overload de albumina em podócitos com exposição prévia à droga nefrotóxica puromicina aminoglicosídeo (PAN). Por último, avaliaremos a capacidade de adesão dos podócitos frente às mesmas condições. É importante salientar que o avanço do conhecimento de vias moleculares específicas poderia permitir a identificação de potenciais alvos terapêuticos para condições de caráter geral ou específico. Se bem-sucedidos, tais estudos futuros poderiam propor a utilização de intervenções capazes de minimizar os efeitos renais deletérios da albumina, contribuindo para a desaceleração da progressão da DRC em muitos pacientes.(AU)