Estudo do efeito do ácido ascórbico na proteção contra radiação UV em células HaCaT com base no desenvolvimento de nanossensores eletroquímicos para detecção localizada e em tempo real

• Processo: 22/03643-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2022
• Situação: Interrompido
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Mauro Bertotti
• Beneficiário: Pedro Henrique Alves Damasceno
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 18/08782-1 - Sensores químicos miniaturizados e integrados: novas plataformas de fabricação para aplicações biológicas, clínicas e ambientais, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/00212-5 - Microscopia Eletroquímica de Varredura (SECM) e Microscopia de Força Atômica (AFM) para estudar mudanças eletroquímicas e morfológicas relacionadas à absorção de ascorbato em células biológicas., BE.EP.DD
• Assunto(s): Eletroanalítica Ácido ascórbico Células HaCaT Antioxidantes Microeletrodos Raios ultravioleta Sensores eletroquímicos Sistemas de tempo-real Microscopia eletroquímica de varredura
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: ambiente celular | Antioxidantes | ascorbato | microeletrodos | Microscopia Eletroquímica de Varredura | sensores eletroquímicos | Eletroanalítica

Resumo

A radiação UV é um dos principais agentes ambientais causadores de câncer e foto-envelhecimento, processo responsável pela formação de rugas e manchas. Diversos antioxidantes celulares, enzimáticos e não enzimáticos estão envolvidos na proteção contra esses processos. Estudos apontam para o importante papel do ascorbato na proteção contra a formação de danos em biomoléculas após exposição ao UV. Conhecer as variações da concentração de ascorbato antes e depois da exposição à radiação UV, assim como a relação entre essas concentrações e lesões em biomoléculas, pode trazer informações importantes sobre o papel dessa espécie na proteção celular. Para estudos em ambientes celulares, a microscopia eletroquímica de varredura (SECM) é uma técnica versátil, pois permite a obtenção de informações rápidas e com elevada resolução espacial. Um dos maiores benefícios da SECM é a exploração de domínios microscópicos, com volume de amostras reduzido. Neste contexto, o principal objetivo do projeto é o monitoramento da concentração de ascorbato em células HaCaT em regiões próximas à superfície e em seu interior, antes e depois de estímulo por irradiação de luz UV. Para avaliar o estresse redox nas células, serão medidos os níveis de 8-oxo-2'-deoxiguanosina e adutos formados pela reação do DNA com produtos da peroxidação lipídica. Os níveis de glutationa oxidada e reduzida também serão avaliados por LC/MS/MS para fins de comparação. Tais estudos irão colaborar no entendimento do perfil dos níveis de vitamina C em células HaCaT (intra e/ou extracelular) ao longo do processo de estresse oxidativo induzido por irradiação UV. O projeto é interdisciplinar, envolve grupo da bioquímica e da química analítica e visa ao estabelecimento de uma relação de causa e consequência para os distúrbios celulares e os níveis de vitamina C observados, bem como definir um nível recomendável de segurança desta substância no que diz respeito à prevenção ou remediação aos danos celulares. (AU)