Desenvolvimento de CARs anti-CD19 específicos para células NK para o aumento de efeitos anti-tumorais no tratamento de leucemias e linfomas.

• Processo: 22/13495-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2026
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Virginia Picanço e Castro
• Beneficiário: Matheus Henrique dos Santos
• Instituição Sede: Hemocentro de Ribeirão Preto. Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da USP (HCMRP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 20/07055-9 - Núcleo de Terapia Celular - NuTeC, AP.NPOP
• Bolsa(s) vinculada(s): 24/20863-8 - Análise Funcional Detalhada de NKG2A Knock-out em NK-CAR-2B4-CD3¿-IL15/IL15R¿ direcionado para CD19 ou ROR1., BE.EP.DR
• Assunto(s): Células matadoras naturais Imunoterapia Terapia baseada em transplante de células e tecidos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células NK | imunoterapia | Nk-Car | receptor quimérico antigênico (CAR) | Terapia celular

Resumo

Cânceres de origem hematológica representam uma parcela significativa dentre os diagnósticos de células neoplásicas. No contexto de tratamento dessa doença, a terapia celular adotiva com células T geneticamente modificadas para expressão de receptores quiméricos antigênicos (CAR) ganha destaque, trazendo resultados clínicos impressionantes. Porém, ainda existem obstáculos associados ao uso de células T modificadas com o CAR, como por exemplo, uso de células autólogas e citotoxicidade relacionada à grande produção de citocinas, fazendo com que a prospecção de novas alternativas terapêuticas seja encorajada. Nesse sentido, a utilização de células NK se torna uma atraente alternativa para a aplicação da tecnologia do CAR, uma vez que essas células têm um papel fisiológico fundamental na imunidade contra tumores. Além disso, sua atividade citotóxica pode ser redirecionada especificamente ao alvo através da modificação com o CAR, sendo sua maior vantagem resguardada no uso de fontes de células alogênicas, uma vez que apresentam o potencial de não induzir ou induzir minimamente a doença do enxerto versus hospedeiro. A construção de CARs específicos para células NK, considerando regiões derivadas de moléculas importantes na ação efetora dessas células no contexto "nativo", é uma importante frente de investigação, uma vez que se constatou que o uso de CARs convencionais desenhados originalmente para células T não desencadeavam atividades efetoras robustas em células NK. Recentemente, nosso grupo de pesquisa desenvolveu com sucesso quatro CARs anti-CD19 contendo combinações de regiões de sinalização derivadas das moléculas 4-1BB, 2B4, DAP12 e CD3¶ com o intuito de obter melhores respostas efetoras de células NK. Para contribuir no avanço do tema exposto, a atual proposta propõe aprofundar comparativamente a caracterização das novas construções em células NK-92 frente a alvos CD19 positivos e a nível das cascatas de sinalização recrutadas pelos diferentes CARs através da técnica de phosphoflow em citometria de fluxo. Posteriormente, iremos validar o efeito das melhores construções em modelos animais de neoplasia de células B. Além disso, o presente projeto de pesquisa propõe a criação de novas construções CARs baseadas nas regiões stalk e transmembrana das moléculas NKp30 e NKp46 e em associação com a sequência completa da molécula de CD3¶, visando-se recapitular a interação que essas moléculas apresentam no contexto nativo de ativação de células NK e, assim, desencadear melhores efeitos citotóxicos direcionados a células CD19 positivas. Sendo assim, os resultados desse projeto apresentam o potencial de contribuir para a geração de células NK-CAR com maior capacidade de ativação e atividade citotóxica.