Estudo do papel de células-tronco da papila apical na migração in vitro de monócitos de sangue periférico humano

• Processo: 23/01852-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2023
• Data de Término da vigência: 19 de agosto de 2024
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Endodontia
• Pesquisador responsável: Carla Renata Sipert
• Beneficiário: Alexandre Guimarães dos Santos
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FO). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Monócitos Biologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ccl2 | Células-tronco da papila apical | monócitos | Biologia Oral

Resumo

Quimiocinas são citocinas que possuem o potencial de atrair determinados grupos celulares, através da quimiotaxia. A CCL2 é a principal quimiocina envolvida no recrutamento de monócitos do sangue periférico para os tecidos, onde, em casos de infecções de origem endodôntica, tais células se diferenciarão em macrófagos e osteoclastos. Sabendo-se que as células-tronco de papila apical (SCAP) são uma importante fonte de CCL2, este estudo tem como objetivo investigar se o sobrenadante de cultura de SCAP é capaz de exercer quimiotaxia em monócitos in vitro. Para tal, o meio condicionado de SCAP será obtido através de cultura primária, após confirmado o potencial de diferenciação osteo/odontogênica destas células. O sobrenadante será, então, submetido à quantificação de CCL2 por meio de ensaio imunoenzimático. Os monócitos serão isolados a partir de sangue periférico humano e semeados em inserto transwell de poros de 8 ¼m que serão posicionados em poços contendo o meio condicionado de SCAP ou SCAP semeadas. As células que não migrarem serão removidas e as restantes serão contadas em microscopia de luz, após serem fixadas e coradas com cristal de violeta. Em determinados poços, será adicionado um anticorpo neutralizante para CCL2 e em outros utilizaremos o CCL2 recombinante humana como controle positivo. A análise estatística será realizada com base no padrão de normalidade dos dados obtidos. Será adotado nível de significância de 5% para a verificação das diferenças entre os grupos.