Geração de um cassete de expressão para silenciamento do gene tRNA ISOPENTENYL TRANSFERASE (tRNA IPT) de Moniliophtora perniciosa por interferência de RNA (RNAi).

• Processo: 23/09151-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
• Pesquisador responsável: Antonio Vargas de Oliveira Figueira
• Beneficiário: Laura Cazetta
• Instituição Sede: Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Citocininas Micro-tom Theobroma cacao Vassoura-de-bruxa Biologia molecular vegetal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: citocininas | Micro-Tom | Moniliophtora perniciosa | Theobroma cacao | Vassoura-de-bruxa | Biologia Molecular de Plantas

Resumo

A "vassoura-de-bruxa" é uma importante doença que acomete o cacaueiro (Theobroma cacao) e é causada pelo fungo basidiomiceto Moniliophtora perniciosa. O fungo é endêmico da região Amazônica, e sua introdução no sul da Bahia levou ao colapso de plantações de cacaueiro e causou importantes mudanças econômicas e sociais na região. Moniliophtora perniciosa se caracteriza por ser um fungo hemibiotrófico, mas diferentemente de outros patógenos com esse estilo de vida, M. perniciosa apresenta uma fase biotrófica sintomática e longa. Os principais sintomas da infecção são inchamento e perda de dominância apical de ramos, com a indução de brotações laterais. O estudo da doença é dificultado pois a interação ocorre entre dois organismos não modelo. Por isso, por haver um biótipo que infecta membros da família Solanaceae (Biótipo-S) e, que quando inoculado, infecta o tomateiro (Solanum lycopersicum) é possível estudar os mecanismos de defesa e patogenicidade utilizando o tomateiro cv. 'Micro-Tom' (MT). Utilizando MT, nosso grupo demonstrou, que pelo menos parte da resposta da planta à infecção tem relação com a sinalização por citocininas. O atlas transcriptômico de vassoura de bruxa indicou a expressão de um gene candidato a uma rota alternativa de biossíntese de citocinina, anotado como tRNA ISOPENTENYL TRANSFERASE (tRNA IPT) no micélio monocariótico, dicariótico e durante a fase biotrófica da infecção em cacaueiro. Assim, este gene necessita ser validado funcionalmente como associado a indução dos sintomas relacionados ao desbalanço de citocinina. Como não é possível manipular geneticamente M. perniciosa, pretende-se gerar plantas transgênicas de MT expressando RNAs interferente para tRNA IPT (p35S:RNAiMptRNA) para avaliar este mecanismo de virulência e o desenvolvimento de sintomas na fase biotrófica da infecção por M. perniciosa. Para tal, este projeto objetiva desenvolver um cassete de expressão para silenciamento do gene tRNA ISOPENTENYL TRANSFERASE (tRNA IPT) de M. perniciosa a ser introduzido em tomateiro.