Identificação e caracterização da região promotora do gene il7r de zebrafish nos estágios iniciais do desenvolvimento embrionário.

• Processo: 23/10216-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2023
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2024
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Embriologia
• Pesquisador responsável: Maraysa de Oliveira Melo Stein
• Beneficiário: Raffael Rotta Bindi
• Instituição Sede: Centro Infantil de Investigações Hematológicas Dr Domingos A Boldrini (CIB). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Hematopoiese Peixe-zebra Biologia do desenvolvimento
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Hematopoiese | Il7R | promotor | Zebrafish | Biologia do desenvolvimento

Resumo

As regiões promotoras são localizadas próximas ao sítio de transcrição e ao início de um gene. Estas regiões regulam tanto a ativação, quanto a inibição de determinados genes em diferentes tipos celulares. Tal processo ocorre por meio da ligação de fatores de transcrição a sequências específicas presentes na região promotora. A diferenciação celular ocorre pela ativação ou inibição de diversos genes, ligação de fatores de transcrição e outras regiões regulatórias, como enhancers. O gene IL7R codifica uma proteína receptora transmembrana fundamental para a diferenciação dos Linfócitos B e T durante o processo da hematopoiese. Para isso, é necessário que ocorra a expressão de IL7R em estágios específicos do desenvolvimento do sistema imunológico. Sabe-se que a hematopoiese é um processo bastante conservado entre todos os vertebrados, em especial entre humanos e zebrafish (Danio rerio). Além disso, o Danio rerio é um modelo que oferece diversas vantagens para estudos moleculares. Baseados nisso, este trabalho busca identificar e caracterizar a região promotora do gene do il7r no zebrafish durante o desenvolvimento embrionário, a fim de compreender sua regulação e expressão. Para isso, sequências acima do sítio de transcrição do il7r de zebrafish, com diferentes tamanhos, serão inseridas em vetores contendo a sequência da proteína verde fluorescente (GFP). Assim, estes constructos serão injetados em embriões de zebrafish no estágio de 1-célula, a fim de avaliar o potencial destes fragmentos em dirigir a expressão do GFP. Estes dados serão, posteriormente, validados por hibridização in situ. Com isso, será possível desenvolver modelos em zebrafish que utilizam o promotor de il7r para dirigir a expressão de mutações potencialmente patológicas.