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Avaliação do potencial remineralizador do ácido poli-aspártico(pAsp) e poli-glutâmico (pGLU) em modelo de dentina bioimpressa 3D utilizando células-tronco da papila apical (SCAPs) e sua aplicação em dentina afetada por cárie.

Processo: 23/18285-3
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de julho de 2024
Data de Término da vigência: 04 de maio de 2025
Área de conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Materiais Odontológicos
Pesquisador responsável:Fábio Dupart Nascimento
Beneficiário:Marina Damasceno e Souza de Carvalho Chiari
Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Bioimpressão tridimensional   Dentística
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Ácido poli-aspártico | Ácido poli-glutâmico | Bioimpressão 3D | Remineralização biomimética | Dentística

Resumo

Os objetivos desse projeto são: 1) avaliar o potencial modulador dos peptídeos pAsp e/ou pGlu em modelos celulares; 2) produzir por meio da bioimpressão 3D uma matriz dentinária mineralizável e biologicamente funcional (scaffold) e caracterizá-la quando em associação com os peptídeos pAsp e/ou pGlu e, 3) avaliar os mecanismos pelos quais o pAsp e pGlu em associação ou não, são capazes de modular o processo de neoformação da dentina. Para isso o projeto será dividido em fases. Fase I: avaliação da modulação causada por peptídeos pAsp e/ou pGlu em modelos celulares. As células (MDPC-23 e SCAPs) serão cultivadas em meios contendo ou não os peptídeos isolados e/ou associados e, posteriormente, analisadas quanto à: proliferação celular; expressão de genes relacionados à diferenciação osteogênica (Osteogenesis RT2 ProfilerTM PCR array); imunodetecção de proteínas (Western Blotting); ensaio de fosfatase alcalina e mapeamento intracelular das proteínas moduladas pelos peptídeos. Ademais, a interação do pAsp e/ou pGlu com o colágeno tipo I será avaliada por Docking molecular e dicroísmo circular (DC). Fase II: bioimpressão do scaffold a partir de uma biotinta carregada com MDPC-23 ou SCAPs. A matriz dentinária bioimpressa receberá ou não a injeção de pAsp e/ou pGlu e será caracterizada quanto á(s): propriedades mecânicas (teste de compressão); degradação; reologia; análise microestrutural (microscopia eletrônica de varredura/MEV); extração de RNA total (RNAt) e ensaio de deposição mineral (ensaio de alizarina). Fase III: avaliação do potencial remineralizador do scaffold bioimpresso associado ou não aos peptídeos quando aplicado à dentina humana afetada por cárie. A remineralização será quantificada através do ensaio de nanoindentação (nanodureza/módulo de elasticidade) realizado na superfície transversal da dentina após 30 dias de armazenamento em contato com o material bioimpresso. O ganho de conteúdo mineral também será mensurado qualitativamente através de microscopia eletrônica de varredura/espectroscopia de raios-x por dispersão em energia das interfaces (MEV/EDS). Para os dados passíveis de quantificação, sendo os resultados homocedásticos e normais, será aplicada a análise de variância (ANOVA) complementada pelo teste de Tukey para contraste entre as médias, com nível de significância de 5%.

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CHIARI, M. DAMASCENO E SOUZA; VICHI, F. MARON; SANTOS, E. IRAE ALMEIDA HUMMEL PIMENTA; DE OLIVEIRA, F. RODRIGUES; HONORIO, H. MARQUES; NASCIMENTO, F. DUPART; BRAGA, R. RUGGIERO. Calcium Silicate Particules: Biological and Mechanical Role in the Hybrid Layer. JOURNAL OF DENTAL RESEARCH, v. N/A, p. 9-pg., . (20/05986-5, 23/10291-4, 23/18285-3)