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Otimização da modificação e interação de anticorpos monoclonais em um sensor SPR para troponina cardíaca

Processo: 24/05950-1
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Data de Início da vigência: 01 de julho de 2024
Data de Término da vigência: 31 de maio de 2025
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Acordo de Cooperação: SEBRAE-SP
Pesquisador responsável:Raul de Macedo Queixada
Beneficiário:Vania Aparecida Mareze
CNAE: Serviços de engenharia
Vinculado ao auxílio:22/08231-0 - Desenvolvimento e validação de um sistema point of care para medição do nível de troponina cardíaca no sangue, AP.PIPE
Assunto(s):Biomarcadores   Cardiologia   Diagnóstico   Infarto   Point of care   Troponina   Síntese proteica
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Biomarcador | Cardiologia | diagnóstico | infarto | point of care | Troponina | Síntese proteica

Resumo

A partir de anticorpos monoclonais e policlonais, específicos contra antígenos alvo, testes de clivagem enzimática por pepsina e papaína serão realizados com o intuito de se obter a máxima eficácia da reação e gerar fragmentos Fab e F(ab)2 em alto teor de rendimento. Metodologias de cromatografia serão utilizadas para a obtenção dos fragmentos individualizadas, como filtração em concentradores com cutoff de 30kDa, uso de resinas conjugadas a proteína A e colunas de exclusão molecular por tamanho. Os antígenos serão produzidos de forma heteróloga em procariotos, após análises de bioinformática com o uso de softwares especializados, concomitantemente análises de expressões, selecionando cepas, tampões, técnicas de lise, metodologias de cromatografia e polimentos por cromatografia por tamanho. Após a produção das proteínas e clivagem dos anticorpos, testes de imunorreatividade serão realizados por metodologias de ELISA e Western Blotting, validando a eficácia de reconhecimento antígeno-anticorpo e também verificando a titulação de reconhecimento. Posteriormente a conclusão dos processos, o aumento gradual de escala será implementado diretamente proporcional a demanda.

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