Avaliação do potencial fértil in vitro de espermatozoides bovinos previamente condicionados em meio suplementado com fluido ovidutal

• Processo: 24/05440-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2024
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2025
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Maíra Bianchi Rodrigues Alves
• Beneficiário: Maria Julia Aparecida Daniel
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Bovinos Capacitação espermática Heparina Produção in vitro de embriões
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bovinos | Capacitação espermática | heparina | produção in vitro de embriões | Biotecnologias da Reprodução

Resumo

A bovinocultura no Brasil é um dos setores da pecuária que mais contribui para a economia do país. Sabendo disso, torna-se evidente a necessidade de que novas técnicas sejam desenvolvidas e aprimoradas para potencializar a produtividade do rebanho. Dentre elas podemos dar destaque às biotécnicas da reprodução, como a produção in vitro de embriões, que tem se mostrado importante ferramenta para a progressão genética e produtividade dos rebanhos. Tal biotécnica, porém, ainda pode ser aprimorada para que resulte na produção de embriões com maior viabilidade, uma vez que os blastocistos produzidos in vitro apresentam menores taxas de prenhez após a transferência que aqueles produzidos in vivo. Uma das diferenças é que, in vitro os espermatozoides não estabelecem contato com o trato reprodutivo da fêmea no momento que antecede a fecundação. Esse período, embora pouco explorado, pode ser benéfico para o condicionamento das células espermáticas devido ao contato com fatores ovidutais, como ocorre in vivo. A exemplo destes fatores ovidutais existem as glicosaminoglicanas (GAGs), que compõem o microambiente uterino-ovidutal e são essenciais para a capacitação espermática e reação acrossomal. In vitro, as GAGs são representadas pela heparina e o condicionamento prévio dos espermatozoides com meios com heparina e/ou outros componentes ovidutais poderia impactar positivamente a produção in vitro de embriões. Para explorar os possíveis efeitos deste condicionamento prévio, neste projeto serão realizados dois experimentos. No primeiro será avaliada a taxa de fecundação e de polispermia após a incubação dos espermatozoides em meio de fecundação in vitro (FIV) contendo 0 µg/mL, 5 µg/mL e 10 µg/mL de heparina. No segundo experimento, o meio FIV que resultar em menor taxa de polispermia no experimento 1 será utilizado para o condicionamento dos espermatozoides em meio suplementado com fluido ovidutal (FO). Para isso, serão formados dois pools de fluido ovidutal (FO) colhidos de 20 tratos reprodutivos de fêmeas bovinas, de forma a obter um pool com FO de fêmeas em fase folicular e outro de fêmeas em fase luteal. Ambos os pools serão formados após a perfusão da região do istmo do oviduto com PBS. Após, os espermatozoides serão incubados em três tratamentos com meio FIV suplementado com (1) 10% do pool FO-folicular, (2) 10% do pool FO-luteal, ou (3) 10% de PBS (controle). Serão avaliadas as taxas de fecundação e polispermia (12 horas após a FIV), de clivagem (D4) e blastocisto (D7). Espera-se que o prévio condicionamento dos espermatozoides com fluido ovidutal de fase folicular resulte em melhores taxas de fecundação e de produção de embriões.