Contribuição de espécies microbianas para a formação de matriz extracelular de biofilmes cariogênicos in situ

• Processo: 24/05965-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2024
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2028
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Marlise Inêz Klein Furlan
• Beneficiário: Anildo Alves de Brito Júnior
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 21/06801-1 - Matriz extracelular: da sua biologia às estratégias para o controle de biofilmes cariogênicos, AP.JP2
• Assunto(s): Biofilmes Cárie dentária Desmineralização Matriz extracelular Microbiologia oral
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biofilme | Carie | Desmineralização | matriz extracelular | Microbiologia Oral

Resumo

A cárie dentária é uma doença mediada por biofilme e modulada por açúcares da dieta, particularmente a sacarose. A principal espécie conhecida na formação de matriz extracelular de biofilmes cariogênicos é Streptococcus mutans, mas, outras espécies poderiam contribuir para a produção e estruturação de substâncias poliméricas extracelulares. Assim, objetivo é investigar a contribuição das espécies microbianas (além de S. mutans) na construção da matriz extracelular de biofilmes in situ submetidos a um regime de dieta cariogênica, comparando-o com uma dieta não cariogênica, pois tais espécies (e suas vias metabólicas) poderiam ser alvos para o controle da disbiose. O experimento in situ será com 16 participantes (modelo com aparato palatino contendo blocos dentários, cruzado, com 4 fases, com períodos de washout) que utilizarão quatro soluções de cada grupo experimental por fase, sendo elas: (1) sacarose e amido (dieta cariogênica); (2) dieta cariogênica+prolina (potencial prebiótico); (3) dieta cariogênica+nitrato de sódio (potencial prebiótico) e (4) água (controle). As análises dos biofilmes incluirão: (a) a avaliação da matriz (composição química/molecular, incluindo marcadores de resistoma no DNA extracelular e detecção de glicoRNA); (b) a determinação da microbiota (DNA-seq para bactérias e fungos) e das vias metabólicas expressas (RNA-seq, detecção de marcadores de resistoma no DNA intracelular); (c) a quantificação de cálcio e fosfato no fluído do biofilme; e (d) a caracterização estrutural. Ainda, será avaliada a desmineralização dos blocos dentários. Os dados serão comparados com bancos de dados para identificar as espécies, as vias metabólicas detectadas, compartilhados ou não entre espécies (ou gênero), os produtos produzidos (componentes da matriz) para determinar a contribuição de cada uma no biofilme cariogênico e se os potenciais prebióticos mantém a homeostase do biofilme.