Impactos eletrofisiológicos e moleculares de três modelos pré-clínicos de pré-eclâmpsia sobre os neurônios magnocelulares produtores de vasopressina

• Processo: 24/09501-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Andre de Souza Mecawi
• Beneficiário: Anne Caroline Silva Barbosa
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 19/27581-0 - Controle da secreção de vasopressina na gestação e suas implicações na fisiopatologia da Pré-Eclâmpsia, AP.JP
• Assunto(s): Núcleo supraóptico Pré-eclâmpsia Vasopressinas Neuroendocrinologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: neurônios magnocelulares | núcleo supraoptico | Pré-eclâmpsia | vasopressina | Neuroendocrinologia

Resumo

Dentre os distúrbios hipertensivos da gravidez, a pré-eclâmpsia (PE) é o que mais se associa à altamorbidade e mortalidade, visto que ocorre sofrimento fetal e complicações em diversos órgãos. Tal fato éconstatado mundialmente e, apesar de afetar majoritariamente mulheres em idade gestacional avançada,jovens em condições financeiras periféricas também estão vulneráveis a tais complicações. Apesar da PEser conhecida e diagnosticada há décadas, ainda não se sabe o mecanismo pelo qual ela é diretamenteativada e como evitar suas complicações. Estudos sugerem que tais complicações fetais e maternas da PEsurjam em virtude da produção do hormônio arginina vasopressina (AVP), produzido pelo hipotálamo eliberado para a corrente sanguínea pela neuro-hipófise. Existem variados modelos animais da PE,especialmente em roedores. Cada modelo possui características distintas da doença e não há umaconclusão sobre o modelo ideal. Neste estudo, hipotetizamos que em distintos modelos animais de préeclâmpsiaa hiperatividade dos neurônios magnocelulares do núcleo supraóptico culmina com intensasecreção de vasopressina. Como objetivos específicos temos 1) Validar a indução de PE em camundongassubmetidas a diferentes modelos animais desta síndrome; 2) Comparar análises bioquímicas e a expressãode genes e proteínas relacionados à sinalização da vasopressina nos rins e placentas dos animaissubmetidos aos modelos de PE; 3) Avaliar variações na atividade eletrofisiológica de vasopressina e olimiar osmótico em neurônios magnocelulares do núcleo supraóptico desses animais. Utilizandocamundongos transgênicos que possuem os neurônios produtores de AVP fluorescentes, iremos avaliar osimpactos de três modelos animais de PE sobre a atividade eletrofisiológica, especificamente dos neurôniosmagnocelulares produtores de AVP. Serão utilizados os modelos baseados na inibição da enzima óxidonítrico sintase (modelo L-NAME), de sobrecarga salina (SS, ingestão obrigatória de NaCl 2.7%) e o modelode isquemia placentária pela ligadura da artéria uterina (modelo RUPP). A pressão arterial dos animais seráaferida por telemetria ao longo de todo o estudo e a eutanásia será feita em três períodos distintos, a fimde se observar a produção de AVP no início, meio e fim dos protocolos. O sangue e a urina serão coletadospara mensuração do marcador de AVP e minerais, bem como para análise da proteinúria.Concomitantemente, os rins, placenta e massas fetais serão coletados, pesados e passarão por análisesmorfofuncionais, que englobarão extração de RNA, reação da cadeia da polimerase tecidual, mensuraçãode proteínas pela técnica de Western blot e análise morfológica por hematoxilina e eosina. Os encéfalosserão coletados e fatias contendo o núcleo supraóptico serão utilizadas para as análises eletrofisiológicasde neurônios magnocelulares a fim de se avaliarem variações na atividade de AVP e as alterações em suaexpressão gênica por PCR de célula única. Em colaboração com o Dr. David Murphy em Bristol (UK)através de estágio BEPE, realizaremos também o sequenciamento de RNA dos rins e placentas dosanimais estudados. O sucesso desta proposta garantirá avanço no conhecimento sobre a fisiopatologia daPE e um conhecimento aprofundado no sistema hipotalâmico neuro-hipofisário e suas implicações com asíndrome, o que poderá trazer esperança para mulheres em idade gestacional mais avançada, bem comoreduzir a morbidade e mortalidade maternal e infantil após o diagnóstico da PE.