Identificação de marcadores moleculares e metabólicos de células persisters isoladas de biofilmes de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii

• Processo: 24/23541-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2025
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2029
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia
• Pesquisador responsável: Ana Marisa Fusco Almeida
• Beneficiário: Gabriel Rezende Pimenta
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Assunto(s): Biofilmes Cryptococcus Metabolismo Persistência Resistência Micologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biofilmes | Células persisters | Cryptococcus | metabolismo | persistência | Resistência | Micologia

Resumo

Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são as leveduras encapsuladas causadoras da criptococose. A criptococose é uma doença fúngica sistêmica caracterizada por acometer indivíduos imunocomprometidos (principalmente C. neoformans) e imunocompetentes (principalmente C. gattii), afetando a via respiratória inferior e muitas vezes posteriormente, o sistema nervoso central. O tratamento antifúngico é agressivo, tóxico e pode ser ineficiente. Neste contexto, a resistência aos fármacos antifúngicos dificulta o tratamento dessas infecções, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Dentre os fatores de resistência dos fungos destaca-se as bombas de efluxo, alterações na enzima-alvo, biofilmes e células persisters. O objetivo deste projeto é avaliar os mecanismos moleculares de resistência e identificar marcadores moleculares específicos nos períodos de transição metabólica propostos para as células persisters de C. neoformans e C. gattii, para o mapeamento de múltiplos alvos e caracterização molecular destas células. A metodologia abordará: (1) cultura de microrganismos; (2) Formação dos biofilmes de ambas as espécies; (3) recuperação e identificação das células persisters; (4) Microscopia confocal de varredura a laser das células persisters; (5) Sequenciamento genômico das células persisters, planctônicas e de biofilmes; (6) Sequenciamento transcriptômico das células persisters, planctônicas e de biofilmes; (7) identificação, categorização funcional e localização de domínios proteicos; (8) Quantificação da expressão de genes-alvo das células persisters; (9) Testes de susceptibilidade.