Otimização da Purificação e Determinação Estrutural por Criomicroscopia Eletrônica (Cryo-EM) do Complexo Flagelar Estator MotAB-FliL em Leptospira interrogans

• Processo: 25/05589-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado Direto
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2026
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Cristiane Rodrigues Guzzo Carvalho
• Beneficiário: Cauê Augusto Boneto Gonçalves
• Supervisor: Albert Guskov
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Groningen, Holanda
• Vinculado à bolsa: 24/10763-6 - Estudo estrutural por criomicroscopia eletrônica do estator flagelar MotA/MotB de Leptospira interrogans, BP.DD
• Assunto(s): Biologia estrutural Proteínas da membrana
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Estrutural | CryoEM | Estator Flagelar | Proteinas de membrana | Biologia estrural; Proteínas de membrana

Resumo

Leptospira interrogans é uma bactéria espiroqueta altamente móvel e o agente causador da leptospirose, uma doença zoonótica com incidência global crescente. O motor flagelar de Leptospira é uma nanomáquina complexa essencial para a motilidade e patogenicidade, impulsionada pela interação entre as unidades do rotor e do estator. O complexo do estator, composto pelas proteínas MotA, MotB e FiIL, desempenha um papel crucial na geração de torque, porém seus mecanismos estruturais e funcionais ainda são pouco compreendidos, especialmente em espiroquetas. O objetivo deste projeto é purificar e resolver a estrutura de alta resolução do complexo do estator MotAB-FiIL de Leptospira interrogans por meio de criomicroscopia eletrônica (cryo-EM). O pequeno tamanho do complexo (aproximadamente 12-15 nm) representa um desafio técnico significativo. Para superar essa dificuldade, o projeto envolverá a otimização da purificação de proteínas de membrana e das metodologias de cryo-EM durante uma visita de pesquisa na Universidade de Groningen, sob a orientação do Professor Albert Guskov, especialista em biologia estrutural de proteínas de membrana. O estudo se concentrará em elucidar a organização estrutural do complexo do estator, com ênfase especial no papel de FiIL na estabilização de MotB e no aumento da geração de torque. Ao resolver a estrutura desse complexo, o projeto pretende fornecer insights sobre os mecanismos moleculares da motilidade flagelar em espiroquetas, contribuindo para uma compreensão mais profunda do movimento bacteriano e da patogenicidade. Os achados não apenas ampliarão nosso conhecimento sobre motores flagelares de espiroquetas, mas também abrirão caminho para futuros estudos sobre motilidade bacteriana e suas implicações para doenças infecciosas. (AU)