Caracterização estrutural e funcional do complexo envolvido no empacotamento do dsDNA em bacteriófagos Caudoviricetes

• Processo: 25/12927-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2025
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2029
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Germán Gustavo Sgro
• Beneficiário: Jairo Herlan Dominguez Antty
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 22/03018-7 - Caracterização estrutural, molecular e funcional de bacteriófagos associados à bactérias de interesse médico e agrícola, AP.PNGP.PI
• Assunto(s): Bacteriófagos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bacteriófagos | Caudoviricetes | Empacotamento | Terminases | Biologia estrutural de macromoléculas

Resumo

Os bacteriófagos da classe Caudoviricetes desempenham um papel crucial na dinâmica microbiana e possuem elevado potencial biotecnológico, especialmente no contexto da fagoterapia. Um passo essencial no ciclo lítico desses vírus é o empacotamento do DNA viral na cápside, processo mediado pelo complexo de terminases. Este projeto tem como objetivo caracterizar estrutural e funcionalmente as terminases de fagos representantes das famílias Podoviridae, Siphoviridae e Myoviridae, isolados no laboratório proponente. A abordagem experimental inclui clonagem e expressão heteróloga dos genes codificantes das terminases, purificação das subunidades, estudos de interação com DNA por técnicas bioquímicas e biofísicas (como EMSA, ITC, DSF), ensaios de atividade ATPásica e endonucleásica, além de análises estruturais por microscopia eletrônica de transmissão com contrastação negativa e criomicroscopia eletrônica (cryo-EM). Espera-se obter dados funcionais e estruturais que permitam comparar os mecanismos moleculares utilizados por terminases de diferentes famílias virais, contribuindo para o entendimento das estratégias de empacotamento de DNA em fagos e abrindo novas possibilidades de aplicação dessas proteínas em biotecnologia e terapias baseadas em vírus. (AU)