Treinamento em enChIP para a identificação de novos fatores de transcrição que regulam a expressão da Sarcolipina em células musculares esqueléticas

• Processo: 25/21923-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 02 de março de 2026
• Data de Término da vigência: 01 de março de 2027
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Leonardo dos Reis Silveira
• Beneficiário: Carolina Martins Lazaro
• Supervisor: Hodaka Fujii
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Hirosaki University, Japão
• Vinculado à bolsa: 24/05514-7 - Fatores de transcrição associados à sarcolipina: Novo caminho para a termogênese, BP.PD
• Assunto(s): Fatores de transcrição Regulação da expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células musculares esqueléticas | enChIP | fatores de transcrição | Regulação gênica | Sarcolipina | Termogênese muscular | Mecanismos de Regulação Gênica e Fatores de Transcrição

Resumo

O enChIP (engineered DNA-binding molecule-mediated chromatin immunoprecipitation) é uma técnica baseada em imunoprecipitação de cromatina que permite o isolamento locus-específico de regiões genômicas por meio de moléculas ligantes de DNA artificiais, como complexos dCas9-gRNA. Essa abordagem possibilita a identificação de proteínas regulatórias ligadas a um determinado locus, preservando o ambiente nativo da cromatina e capturando interações tal como ocorrem em células vivas. Este projeto tem como foco a sarcolipina (SLN), um micropeptídeo específico do músculo com papel crítico na termogênese sem tremores. Ao desacoplar a atividade da SERCA (Ca²-ATPase do retículo sarcoplasmático/endoplasmático), a SLN promove um ciclo fútil de cálcio, aumentando o consumo de ATP e a produção de calor. Por esse mecanismo, a SLN eleva o gasto energético basal e desponta como um alvo molecular promissor para o tratamento da obesidade e de distúrbios metabólicos. Resultados preliminares do grupo demonstram que a expressão da SLN é consistentemente aumentada em miotubos C2C12 expostos a tratamentos farmacológicos como cafeína, LPS e salbutamol. A partir desses dados, a primeira etapa do estágio implementará o enChIP no modelo C2C12 para isolar o promotor da SLN e identificar seus reguladores transcricionais endógenos. O modelo foi escolhido por sua reprodutibilidade, robustez e responsividade a estímulos termogênicos. Após a padronização, o protocolo será expandido para miotubos primários murinos e células musculares esqueléticas humanas. Até onde se tem conhecimento, esta será a primeira implementação de enChIP na América Latina. O treinamento na Hirosaki University, onde o enChIP foi originalmente desenvolvido, proporcionará acesso direto ao conhecimento técnico, à mentoria especializada e aos reagentes padronizados. A experiência permitirá à candidata transferir a metodologia para o Brasil e incorporá-la a estudos presentes e futuros sobre regulação transcricional no músculo esquelético, ampliando a capacidade nacional em epigenômica e biologia da expressão gênica. Além do domínio técnico, o estágio fortalecerá colaborações internacionais e estabelecerá no Brasil uma nova plataforma para investigação de redes transcricionais in vitro. Esses resultados são essenciais para a continuidade e o sucesso do projeto de pós-doutorado da candidata e poderão contribuir para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas contra doenças metabólicas, como a obesidade. (AU)