Obtencao da l-asparaginase de escherichia coli por dna recombinante. influencia de diferentes condicoes de cultivo na biossintese.

• Processo: 02/04023-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Jose Abrahao Neto
• Beneficiário: Daniela Knoll Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): DNA recombinante Escherichia coli L-asparaginase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Condicoes De Cultivo | Dna Recombinante | Escherichia Coli | L-Asparaginase

Resumo

Tendo em vista a importância farmacológica da enzima L-Asparaginase II, utilizada no tratamento de leucemias, este projeto propõe um estudo direcionado para a obtenção e determinação dos parâmetros mais importantes relacionados a biossíntese desta enzima, preliminarmente em E.coli. As seguintes linhas estratégicas serão adotadas:- Será clonado o gene da L-Asparaginase II com o peptídeo sinalizador, expresso em E.coli e avaliado o tempo ideal para a produção da proteína recombinante e atividade biológica. A seguir será estudado o rendimento e a viabilidade econômica do sistema de DNA recombinante em relação a obtenção por simples processo fermentativo. Serão verificadas as influências de diversos fatores como: aeração, pH, fontes de nitrogênio orgânica (uréia, peptona, aminoácidos) e inorgânicas (sulfato de amônio, cloreto de amônio), fontes de carbono e intermediários metabólicos (lactato, piruvato, oxalacetato). Verificar se a otimização dos parâmetros permanece sob ampliação de escala. (AU)