Isolamento do viruso da imunodeficiencia felina em celulas crfk e padronizacao do pcr em tempo real para quantificacao dos virus no sobrenadante.

• Processo: 06/60516-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: João Pessoa Araújo Junior
• Beneficiário: Aline Augusti
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Reação em cadeia da polimerase em tempo real Vírus da imunodeficiência felina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Crfk | Dna Proviral | Fiv | Gatos Domesticos | Pcr Em Tempo Real | Producao De Cdna

Resumo

O vírus da imunodeficiência felina (FIV), é um lentivirus que causa imunodeficiência em gatos domésticos, apresentando íntima semelhança ao vírus da imunodeficiência humana com relação a características genéticas, bioquímicas e morfológicas, bem como as manifestações clínicas e hematológicas. Uma das diferenças entre HIV e FIV é que este último não utiliza o receptor CD4+ como primário, tendo tropismo por outros tecidos in vivo, infectando também células mononucleares como linfócitos T CD8+, linfócitos B, macrófagos, astrócitos e células da linhagem CrFK Quando esse vírus infecta as células da linhagem CrFK produz efeitos citopáticos variantes de acordo com a clade viral estudada. Há cinco clades virais denominadas A, B, C, D e E. O responsável por esta diversificação é a região de hipervariabilidade do gene env. Este trabalho possui o objetivo de realizar o isolamento viral em células da linhagem CrFK e padronizar a técnica de PCR em tempo real utilizando o sistema SYBR® Green para quantificação viral em sobrenadante de cultura. Para tanto serão utilizados como fonte de vírus gatos naturalmente infectados com a clade B do FIV e que fazem parte de um experimento paralelo cujo número do protocolo Fapesp é 05/53786-5. No procedimento de isolamento viral serão utilizados estimulantes Concanavalina A e Inteleucina 2 recombinante. Também será padronizado o PCR em tempo real para quantificação relativa com o auxílio do aparelho SDS7300 (Applied Biosystems) e software. (AU)