Estudo do mecanismo intracelular e sequenciamento do fator vacuolizante citotoxico (vcf), uma serina protease de aeromonas sobria e aeromonas veronii biovar sobria.

• Processo: 07/58393-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Tomomasa Yano
• Beneficiário: Luciano Moura Martins
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Purificação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aeromonas Biovar Sobria | Atividade Anti Tumoral | Citotoxina | Purificacao | Sequenciamento Do Vcf

Resumo

Recentemente verificamos a presença de uma citotoxina denominada fator citotóxico vacuolizante (VCF) de A. sóbria e A. veronii bv. sóbria, uma citotoxina capaz de induzir formação de vacúolos citoplasmáticos assim como alterações mitocondriais que devem sinalizar vias apoptóticas, levando as células à morte. Descrevemos o processo de purificação deste fator citotóxico utilizando técnicas de cromatografia de afinidade com íon metálico (Íon Metallic Affinity Chromatography - IMAC). O VCF é uma enterotoxina não hemolítica que é uma serina protease, o que demonstra que esta citotoxina é diferente da "aerolisina", uma toxina considerada como o principal fator de virulência de Aeromonas. Contudo o VCF pode ser parcialmente neutralizado por soro anti-aerolisina, resultado que pode confirmar similaridade estrutural entre estas toxinas e que somente poderá ser avaliado com o seqüenciamento do VCF. Este projeto tem como objetivo dar continuidade aos estudos deste fator citotóxico, tanto em relação a sua estrutura como em relação ao seu mecanismo de ação. Pretendemos ainda conduzir ensaios com células tumorais humanas e posteriormente com animais de experimentação portadores de neoplasias, em função das características de morte celular induzidas pelo VCF nas diferentes linhagens celulares estudadas até o momento. Com este estudo verificaremos se a toxina possui a capacidade de reduzir a proliferação de tumores primeiramente in vitro e posteriormente in vivo. (AU)