Estudo das propriedades imunologicas da regiao globular da fibra adenoviral fusionada a um peptideo conservado da gp120 de hiv-1

• Processo: 08/53332-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Armando Morais Ventura
• Beneficiário: Luis Ernesto Farinha Arcieri
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão de proteínas Vacinas de DNA Adenovirus Imunização HIV
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Adenovirus | Expressao De Proteinas | Hiv | Imunizacao | Proteinas De Fusao | Vacinas De Dna

Resumo

Os Adenovírus (Ad) são vírus de DNA que têm sido amplamente estudados pelo seu uso potencial em experimentos de terapia gênica e de imunização. Devido à necessidade de alterar o tropismo dos vetores adenovirais, a estratégia de modificar as proteínas do capsídeo viral tem sido investigada. Dessas proteínas, foi demonstrado que a Fibra adenoviral pode incorporar peptídeos tanto no loop HI quanto no C-terminal com sucesso. Essas modificações permitiram a mudança do tropismo viral. A exposição de epítopos nas proteínas do capsideo viral também tem sido utilizada com fins de imunização. A introdução de epítopos na proteína Fibra mostrou a indução de uma forte resposta imune contra o epítopo introduzido, indicando a possibilidade de utilização da Fibra como adjuvante. Neste projeto propomos dar continuidade aos estudos iniciados no meu doutorado, onde trabalhei com a exposição do domínio C4 da proteína gp120 do HIV no loop CD, e do peptídeo V5 no carboxi terminal da região globular da Fibra adenoviral (RGFA). Pretendemos construir vetores de expressão procarióticos e eucarióticos que expressem uma versão modificada da RGFA, capaz de incorporar epítopos de outras proteínas com facilidade. Para tanto, o gene da proteína será modificado com a inserção de sítios de clonagem tanto no loop HI quanto no C-terminal, aonde será incorporada a seqüência nucleotídica do domínio C4. Os vetores gerados serão utilizados para imunização de animais de experimentação e o estudo da resposta imune induzida permitirá determinar a possibilidade de utilização da RGFA como adjuvante, abrindo a possibilidade de exposição de outros epítopos imunogênicos. (AU)