Construção e caracterização de scFv de anticorpo monoclonal anti-idiotípico para CEA, Mab 6.C4

• Processo: 98/09630-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 1998
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Sang Won Han
• Beneficiário: Graciela Conceicao Pignatari
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Imunoterapia Terapia genética Biomarcadores tumorais Antígeno carcinoembrionário Imunidade ativa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpo Anti-Idiotipo | Cea | Imunoterapia | Marcador Tumoral | Scfv | Terapia Genica

Resumo

Antígeno carcinoembrionário (CEA) é um marcador tumoral para diversos cânceres de origem epitelial e tem sido apontado como alvo potencial para imunoterapias ativa e passiva. Entretanto, como o próprio nome indica, CEA em humanos é expresso durante a vida embrionária e por isso qualquer protocolo de imunização ativa, para ser eficiente, deve considerar os mecanismos de tolerância envolvidos. Uma abordagem para contornar essa dificuldade seria através da utilização de anticorpos anti-idiotípicos que, ao mimetizarem o antígeno, poderiam apresentar epitopo de CEA em um contexto molecular diferente e, assim estimular resposta. Nosso grupo descreveu anteriormente anticorpo monoclonal anti-idiotípico (AB2) (Mab 6.C4) para CEA que se mostrou eficientemente capaz de mimetizar CEA e de elicitar resposta humoral AB3 (anti-anti-idiotipo) capaz de reconhecer CEA in vitro e in vivo. No presente projeto pretendemos clonar e sequenciar a região V do Mab 6.C4 para comparação com a sequência de CEA, bem como para construção de vetores para imunização ativa. Para imunização ativa, vetores retrovirais expressando scFv-6.C4 junto com GM-CSF ou IL-2 serão construídos e avaliados. O scFv-6.C4 também será expresso em bactéria e purificado para caracterização bioquímica e imunização posterior. (AU)