Mecanismo do transporte de próton pela proteína desacopladora de mitocôndrias de plantas (PUMP)

• Processo: 00/00194-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Hernan Chaimovich Guralnik
• Beneficiário: Paula Bresciani Martins de Andrade
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Plantas Arabidopsis thaliana Proteínas de transporte Proteínas de desacoplamento mitocondrial Lipossomos Ácidos graxos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Acidos Graxos | Desacoplamento | Fluorescencia | Lipossomos | Mitocondria | Pump

Resumo

Em plantas, foi descoberta uma proteína mitocondrial desacopladora em tubérculos de batata (PUMP), que é uma proteína hidrofóbica de 32 kDa semelhante à proteína desacopladora de mamíferos (UcP). Estudos de Vercesi e colaboradores demonstraram que esta proteína, da mesma forma que a UcP de mamíferos, aumenta a condutividade da membrana a prótons quando incorporada em lipossomos (Vercesi et al, 1995). A PUMP transporta ânions de ácidos graxos (FA), tanto em mitocôndrias intactas quanto em sistemas reconstituídos (Vercesi et al, 1995; Jezec et al, 1996; Jezec et al, 1997). Um cDNA (StUcP) codificando uma proteína desacopladora foi isolado de uma biblioteca de flor de batata (Laloi et al., 1997) e foi isolado um clone de cDNA de Arabidopsis thaliana que codifica a PUMP denominado AtPUMP (Maia et al., 1998). O mecanismo pelo qual os FAs ativam o transporte de H+ não está esclarecido, e nosso objetivo a longo prazo é elucidar o mecanismo molecular de desacoplamento mediado pela PUMP. Os nossos objetivos imediatos são: Purificar a PUMP clonada (que será usada nos ensaios de incorporação em lipossomos de fosfatidilcolina), determinar as constantes de partição de FAs de cadeia longa, verificar as propriedades da AtPUMP reconstituída (Km aparente, Vmáx aparente) , realizar medidas de exo de H+ a diferentes temperaturas, determinar a dependência do potencial transmembrânico, fazer estudos calorimétrico com PUMP (Pump x termogênese). (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ANDRADE, Paula Bresciani Martins de. Proteína desacopladora mitocondrial de plantas, PUMP: Estudos calorimétricos e funcionalidade da atPUMP de Arabidopsis thaliana expressa em E. coli. 2002. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ) São Paulo.