Aplicação da biolistica para a transferência transiente de genes em embriões

• Processo: 95/07457-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 1996
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 1999
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Luiz Lehmann Coutinho
• Beneficiário: Luciana de Andrea Ribeiro
• Instituição Sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Liberação epidérmica de DNA mediada por partículas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aves | Biolistica | Transformacao

Resumo

A biolística é um método físico para a introdução de ácidos nucléicos e outras substâncias no interior de células e tecidos intactos, através da aceleração de micro-partículas a altas velocidades. Esta técnica tem sido cada vez mais utilizada na produção de organismos transgênicos, devido a alguns fatores como: baixa manipulação do alvo a ser bombardeado, simplicidade e rapidez no procedimento de bombardeamento, liberação de altas doses de DNA em alvos específicos, bombardeamento simultâneo de muitas células e possibilidade de co-transformação com dois ou mais plasmídios. Este trabalho propõe o desenvolvimento e otimização da técnica de transferência de genes para embriões de galinha, através do estudo de diversos parâmetros como: tipo e tamanho de partícula, pressão de hélio, nível de vácuo na câmara de bombardeamento, distância da fonte de força ao macro-carreador, distância do macro-carreador à tela de retenção, distância da tela de retenção à célula-alvo, concentração de DNA, estágio de desenvolvimento do embrião, profundidade e área de penetração das partículas no tecido, número de bombardeamentos, tempo de expressão do gene introduzido e outros parâmetros que se apresentem. (AU)