Expressao das proteinas vp1 e vp2 do parvovirus humano b19 para a producao de kit diagnostico.

• Processo: 99/10974-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Edison Luiz Durigon
• Beneficiário: Helina Maria dos Reis
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Expressao De Proteinas | Parvovirus Humano B19 | Vp1 E Vp2

Resumo

O projeto propõe a clonagem e expressão do gene que codifica as proteínas estruturais VP1 e VP2 do parvovírus humano B19 e a posterior utilização destas proteínas recombinantes purificadas como antígeno para Kit Diagnóstico deste referido vírus. Assim, pretende-se desenhar oligonucleotídeos complementares às seqüências de VP1 e VP2 contendo sítios de restrição apropriados a cada estratégia de clonagem. Após a obtenção do DNA viral, os insertos correspondente às proteínas de interesse serão amplificados pela técnica da PCR (Reação da polimerase em cadeia) e clonados em vetores de expressão em bactéria. Posteriormente, os clones positivos serão induzidos a expressar os polipeptídeos, que serão purificados em colunas de afinidade a metal e analisados em ensaios imunológicos ELISA (ensaio imunoenzimático) e Western Blot. As proteínas recombinantes purificadas serão padronizadas e utilizadas em testes de imunogenicidade a partir de amostras clínicas positivas para o BI9 confirmadas pela metodologia padrão de ELISA de captura. (AU)