Caracterização funcional de genes diferencialmente expressos e analise do proteoma de linhagens de glioma de rato sensíveis e resistentes a hormônios anti-tumorais glicocorticóides

Resumo

Tumores cerebrais do tipo glioma e glioblastoma estão entre os mais freqüentes e fatais do sistema nervoso central. Hormônios glicocorticóides (GC) são utilizados na quimioterapia destes tumores, entretanto, seu mecanismo ainda é pouco conhecido. A linhagem celular C6 foi estabelecida em cultura a partir de um glioma de rato, induzido quimicamente por metilnitrosuréia. Variantes hipersensivel (ST1) e resistente (P7) ao tratamento com GC foram isoladas a partir da linhagem C6. A variante ST1 tem sido utilizada para o estudo do mecanismo de ação de GC, uma vez que esta linhagem reverte do fenótipo transformado e tumoral para normal, sob a ação destes hormônios. Uma das estratégias que vem sendo utilizada é o isolamento e clonagem de genes diferencialmente expressos a partir de ST 1 sob tratamento com GC. Esta abordagem já permitiu isolar, identificar e caracterizar parcialmente cerca de uma dezena de genes diferencialmente regulados por GC. Neste projeto, propõe-se: a) isolar os cDNAs completos correspondentes a alguns destes genes diferencialmente expressos e realizar sua caracterização funcional in vitro; e b) implementar no laboratório a tecnologia de eletroforese bi-dimensional, aliando-a a procedimentos de quantificação e identificação, para gerar perfis protéicos e identificar as proteínas diferencialmente expressas na presença do agente anti-tumoral. Essas estratégias poderão revelar ferramentas gênicas valiosas para diagnóstico, acompanhamento e terapia tumoral. (AU)