Análise de aneuploidias por hibridação genômica comparativa (CGH) em pacientes pediátricos portadores de leucemia linfóide aguda

Resumo

O câncer é um processo multi-estágios caracterizado pelo acúmulo de eventos mutacionais. Comumente as células cancerosas exibem várias formas de instabilidade genética, como variações no número cromossômico (aneuploidias), translocações e mutações gênicas. Nos pacientes com leucemias, bem como em outros tipos de neoplasias, os rearranjos cromossômicos recorrentes auxiliam no diagnóstico, prognóstico, classificação de risco e na decisão de terapia a ser utilizada.No presente trabalho está sendo proposta a detecção de alterações cromossômicas numéricas e estruturais não-balanceadas, mediante a aplicação do método de CGH (Comparative Genome Hybridization) e a subseqüente validação por FISH (Hibridação in situ Fluorescente) com diferentes tipos de sondas, em amostras de pacientes pediátricos diagnosticados com Leucemia Linfóide Aguda no Laboratório de Pediatria do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Serão utilizadas amostras de medula óssea estocadas de 30 pacientes diagnosticados com Leucemina Linfóide Aguda admitidos no período de 1998-2006. O critério para inclusão dos pacientes no estudo baseia-se na necessidade de complementar o diagnóstico clínico dos mesmos, sendo todos negativos para as quatro alterações estruturais mais freqüentes em crianças: t(12;21), t(9;22), t(4;11) e t(1;19) (analisadas previamente por RT-PCR), e a falta de morfologia cromossômica suficiente para a análise.As metodologias propostas permitirão a detecção de marcadores genéticos associados com essa doença, principalmente trissomias, e ganhos e perdas cromossômicos envolvidos no processo de gênese tumoral. Os resultados desta pesquisa poderão contribuir para a caracterização da doença e fornecer informações que colaborem para a elucidação dos mecanismos de transformação leucêmica, bem como possibilitar a distinção entre grupos de risco.