Métodos para análises de pequenas moléculas em fluidos biológicos: o uso de colunas de meios de acesso restrito para injeção direta de amostras

Resumo

Como solução ao paradigma de obtenção de máxima eficiência em menor tempo de análise, separações em 2D no âmbito da Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) têm sido exploradas com sucesso. As análises multidimensionais são usadas para uma variedade de amostras complexas e/ou em matrizes complexas. No preparo de amostras, as separações em duas dimensões são feitas com acoplamentos de colunas de acesso restrito a colunas aquirais e/ou quirais, para uma variedade de classes de compostos e em diferentes matrizes. A vantagem, nesses casos, é que o processo de tratamento da amostra pode ser completamente automatizado. Nos últimos anos o acoplamento da cromatografia líquida ao espectrofotômetro de massas (LC-MS) possibilitou um grande avanço nos estudos de metabolismo e biodisponibilidade de micromoléculas e seus produtos de biotransformação em organismos vivos e assim, possibilitou a quantificação, em escala cada vez menor, de pequenas moléculas em matrizes complexas. Esses sistemas que aliam a cromatografia líquida à espectrometria de massas conferem sensibilidade, precisão, seletividade e rapidez aos métodos desenvolvidos, e estão sendo cada vez mais utilizados em uma variedade de áreas. Neste projeto, a cromatografia multidimensional será empregada no modo hart-cut para quantificação de análises de fármacos/biomarcadores em fluidos biológicos por injeção direta de amostras. Esse projeto se insere na linha de pesquisa consolidada no grupo no uso de fases de acesso restrito de albumina sérica bovina (RAM-BSA) para injeção direta de amostras biológicas e difere nas matrizes selecionadas urina e leite humano, assim como, no desenvolvimento e aplicação de colunas RAM-BSA iônicas para quantificação de compostos anfóteros em urina humana e leite bovino. (AU)