Estudo do metabolismo local de estrógenos nas lesões peritoneais de mulheres com endometriose

Resumo

Estima-se que uma em cada 10 mulheres na fase reprodutiva possa ser afetada por endometriose, uma desordem estrógeno-dependente. A disponibilidade de estrógeno necessário para manutenção da doença é determinada pelo balanço entre sua produção e seu metabolismo. Assim, a expressão e atividade de enzimas envolvidas por um lado, na síntese e conversão de estrógenos e por outro, no metabolismo oxidativo ou conjugativo de estrógenos, determina a progressão da doença. A síntese de estrógenos tem sido amplamente explorada no estudo da patogenia da endometriose, principalmente em relação à expressão de aromatase. Paradoxalmente, estudos relacionados ao metabolismo de estrógenos tem recebido pouca atenção científica, apesar da importância que o mesmo pode representar à disponibilidade de estrógenos. O intuito deste trabalho é explorar o envolvimento de enzimas responsáveis pelo metabolismo oxidativo (CYP1A2, 1B1 e 3A4) e conjugativo (UDP-glucurosiltransferase e estrógeno sulfotransferase) de estrógenos na endometriose, já que a maioria destas enzimas ainda não foi descrita em lesões endometrióticas. O plano de trabalho compreenderá 3 etapas, sendo a primeira a validação das técnicas a serem utilizadas, com ênfase na coleta e congelamento adequados para recuperação de RNA para estudos de expressão gênica. A segunda etapa compreende estudo da expressão gênica e concentração das enzimas utilizando-se PCR em tempo real e Western Blotting, respectivamente. Já a terceira e última etapa tratará da atividade das enzimas oxidativas estudadas e da concentração de metabólitos (oxidativos e conjugados) de estrógenos na lesão de endometriose e líquido peritoneal. No intuito de atingir este objetivo, será estabelecida uma cultura de células endometrióticas (ou alternativamente, cultivo de extratos teciduais) a partir de amostras de endometriose, para que inibidores específicos de cada enzima possam marcar a atividade de cada uma delas. (AU)