O USO DE microRNA PARA O TRATAMENTO DO CÂNCER DE PRÓSTATA: ESTUDOS IN VITRO E IN VIVO

Resumo

Micro RNA (miRNA) são reguladores importantes da expressão dos genes e suas alterações estão relacionadas ao desenvolvimento e progressão de neoplasias. Estudos da literatura e resultados anteriores obtidos pelo nosso laboratório implicam alguns miRNAs na progressão e recidiva bioquímica do câncer de próstata. O intuito desse estudo é a pesquisa do papel de miRNA no tratamento do câncer de próstata metastático em modelos in vitro e in vivo. Método: As linhagens PC3, DU145 e LNCaP serão utilizadas nos experimentos in vitro. Os miRNA e seus antiMiRs serão transfectados com o uso da lipofectamina. Avaliaremos os índices de proliferação, apoptose e ploidia por citometria de fluxo. Alterações na capacidade de invasão celular serão analisadas com o uso de matrigel. Os níveis de expressão dos genes-alvo RAS, MYC, MMP9, CD44 e SMARCA5 serão avaliados pela técnica de PCR quantitativo em tempo real. Camundongos atímicos, machos com 5 ou 6 semanas receberão injeção por via intraventricular com a linhagem PC-3M-Luc-C6. No dia 20 será avaliado o desenvolvimento das metástases ósseas com o sistema de imagens in vivo IVIS. Os animais serão tratados com os miRNA e respectivos antiMiR nos dias 23 e 26 sendo avaliadas as repostas através das medidas das lesões com o mesmo equipamento nos dias 30, 34, 38, 42 e 44. No dia 48 após o último exame de imagem os animais serão sacrificados e seus órgãos analisados macro e microscopicamente.