Análise do efeito do tamoxifeno e da BMP-7 em modelo experimental de fibrose peritoneal em ratos com Doença Renal Crônica

Resumo

A diálise peritoneal constitui uma opção terapêutica extremamente importante para o paciente com Doença Renal Crônica (DRC) em estágio V. Entretanto, em longo prazo, alterações morfofuncionais decorrentes da bioincompatibilidade das soluções de diálise, infecções peritoneais e o estado urêmico dos pacientes, induzem um processo inflamatório e fibrótico da membrana peritoneal, levando a perda da eficácia deste método dialítico. Neste estudo, a DRC com uremia será induzida em ratos machos Wistar através da administração de dieta rica em adenina, durante o período de 30 dias, sendo que nos últimos 15 dias os animais receberão injeções intraperitoneais de Gluconato de Clorexidina (GC) para a indução de peritonite. Os tratamentos com tamoxifeno e BMP-7 serão iniciados no mesmo período da administração de GC. Durante o período de acompanhamento serão verificados: peso dos animais, pressão arterial e uréia e creatinina séricas. Ao término do período de acompanhamento, os animais serão sacrificados e o peritônio analisado através de: histologia (Tricrômio de Masson); imuno-histoquímica para macrófagos, linfócitos T, miofibroblastos (±-actina de músculo liso) e PCNA; e PCR em tempo real para a expressão de citocinas pró-inflamatórias (IL-1ß, TNF-±, INF-³ e IL-6) e fatores fibrogênicos (VEGF, TGF-ß1, colágeno I, colágeno III, fibronectina e FSP-1). Também será realizado PCR em tempo real e Western Blot para a expressão de Smad 2, 3, 5 e 7. Além disso, Western Blot será feito para as mesmas Smads, porém, na sua forma fosforilada. Por fim, um estudo in vitro utilizando células mesoteliais imortalizadas será realizado para elucidar os mecanismos envolvidos no processo de fibrogênese no peritônio. (AU)