O cotransportador Na+, K+, 2Cl- e a secreção de cloreto branquial em camarões Palaemonidae (Decapoda, Crustacea): padrões moleculares, fisiológicos e evolutivos

Resumo

Como resultado do seu passado evolutivo, a família Palaemonidae reúne representantes de ambientes osmóticos dos mais variados. Sejam de habitats marinhos ou dulcícolas, estáveis ou variáveis, estes camarões respondem em nível celular e sistêmico a fatores abióticos como a salinidade. Os desafios osmóticos impostos pelo ambiente são compensados fisiologicamente, proporcionando a homeostase hidroeletrolítica do meio interno. Um importante local de transporte iônico compensatório é o epitélio brânquial, pois nas membranas de seus ionócitos constituintes encontra-se um conjunto de transportadores que efetuam o movimento transepitelial de íons. Dentre estes, o cotransportador Na+, K+, 2Cl- (NKCC) tem um papel notável na captação e de secreção de sal, além de participar da regulação do volume celular em células não-epiteliais. No presente projeto, caracterizar-se-á o papel do NKCC em várias espécies de camarões palemonídeos dos gêneros Macrobrachium, Palaemon e Palaemonetes, que ocupam diferentes nichos osmóticos e que apresentam padrões osmorregulatórias distintas. Avaliar-se-á o efeito da exposição a diferentes salinidades sobre a osmolalidade e concentração de Cl- da hemolinfa, bem como da expressão quantitativa gênica e protéica do NKCC branquial por análises moleculares e bioquímicas. A localização precisa do NKCC, se na membrana basal ou apical dos ionócitos, será estabelecida por imunofluorescência em cortes histológicos. Diante dessa caracterização molecular, morfológica e fisiológica do NKCC em palemonídeos, examinar-se-á as hipóteses de (i) um efeito da salinidade na evolução da capacidade de regulação de Cl- da hemolinfa e na expressão gênica e protéica do NKCC, e (ii) da existência de um padrão filogenético nesses parâmetros. Essa análise por métodos filogenéticos comparados permitirá a reconstrução da história evolutiva da osmorregulação em nível molecular, celular e sistêmico nos palemonídeos escolhidos.