Perfil diferencial de expressão gênica em células do cumulus de mulheres inférteis com e sem endometriose submetidas à estimulação ovariana

Resumo

Questiona-se um possível papel deletério da endometriose sobre a qualidade oocitária (QO). Como os oócitos humanos são extremamente raros e a sua utilização em estudos invasivos, que impossibilitam a utilização dos mesmos nos procedimentos de reprodução assistida, geralmente não é exequível, a identificação de biomarcadores não invasivos, passíveis de predição da qualidade oocitária, é bastante desejável. Neste contexto, as células do cumulus (CCs) podem ser utilizadas como biomarcadores indiretos de QO. Desta forma, a análise do perfil de expressão gênica em CCs poderá trazer valiosas informações sobre vias desreguladas envolvidas na etiopatogênese da infertilidade relacionada à endometriose, cujo entendimento, favorecerá a investigação do seu papel no prognóstico gestacional e o delineamento de estudos de intervenção terapêutica. Objetivos: Determinar o conjunto de RNAs mensageiros expressos (perfil de transcritos) em CCs de mulheres inférteis sem e com endometriose (estadios I/II e estadios III/IV, com e sem endometrioma) submetidas à estimulação ovariana controlada para ICSI por sequenciamento de nova geração e comparar o perfil dos transcritos entre os grupos propostos. A partir da identificação dos genes diferencialmente expressos, iremos identificar as vias onde estes genes alterados estão envolvidos e correlacionar com a doença e com a infertilidade, realizando a validação dos genes mais promissores por PCR-RT. Metodologia: Serão analisadas no estudo CCs de 4 grupos de pacientes; sendo 1 grupo controle, 1 grupo com endometriose I/II, 1 com endometriose III/IV (sem endometrioma) e 1 com endometriose III/IV (com endometrioma). Todas as pacientes serão submetidas à EOC para a realização de ICSI. Imediatamente após a captação oocitária, as CCs serão isoladas e armazenadas para o sequenciamento de nova geração (RNA-Seq), além disso, serão realizadas análises de expressão de genes alvos selecionados após a análise de bioinformática por PCR em tempo real. (AU)