Estudo de vias envolvidas na sinalização de Aurora quinases e mecanismos de ação do inibidor AMG 900 em tumor adrenocortical

Resumo

Adrenocarcinonas são tumores de baixa incidência entre os cânceres. Entretanto, uma mutação no gene TP53, comumente encontrada na população da região sul do Brasil, aumenta a predisposição à doença. Ainda não há terapias eficazes para estágios mais avançados de adrenocarcinomas, o que leva a um baixo índice de sobrevida em pacientes com tumores no estágio IV. Portanto, a descoberta de novos alvos terapêuticos é de fundamental importância para o desenho de drogas efetivas no tratamento de carcinoma adrenal. Recentemente, foi descrito pelo nosso grupo que a expressão de Aurora quinases está frequentemente elevada em tumores com estágios clínicos avançados sugerindo que a expressão dessas proteínas pode estar fortemente associada com a tumorigênese. O AMG 900, um potente e altamente seletivo pan-inibidor de Aurora quinases é biodisponível oralmente e ativo em linhagens celulares que são resistentes a múltiplas drogas, sendo capaz de potencializar os efeitos antiproliferativos do paclitaxel e diminuir a proliferação de diferentes linhagens de câncer de mama e de leucemia mielóide. Atualmente, o AMG 900 está em fase 1 de testes clínicos em pacientes com tumores avançados. Estudos realizados em nosso laboratório mostram que a inibição de Aurora quinases após tratamento com o inibidor AMG 900 em uma linhagem de adrenocarcinoma leva à inibição da proliferação celular e à inibição da síntese de diferentes hormônios. Sendo assim, o objetivo deste trabalho é buscar vias envolvidas na sinalização das Aurora quinases e os possíveis mecanismos de ação do inibidor AMG 900 ainda não descritos na literatura. Pretende-se analisar as diferenças no conteúdo de proteínas em duas linhagens de carcinoma adrenal, NCI-H295R e SW13, após tratamento com o inibidor de Aurora quinases, AMG 900, através de estratégias de análises proteômicas. Serão selecionados como alvos de validação dos resultados proteômicos, proteínas relacionadas com a síntese de hormônios e desenvolvimento tumoral. Após a validação dos alvos selecionados, os genes codificadores das proteínas validadas serão silenciados pela técnica de siRNA e estes passarão por uma segunda fase de triagem na qual serão realizados ensaios funcionais como migração, proliferação celular, apoptose e síntese de hormônios para esclarecer a participação desses alvos no desenvolvimento e progressão de adrenocarcinoma. Os dados obtidos nos permitirão esclarecer vias envolvidas na sinalização de Aurora quinases e os possíveis mecanismos de ação do inibidor AMG 900 ainda não descritos na literatura, contribuindo para o desenho racional de novas drogas que poderão atuar individualmente ou em combinação com o AMG 900.