Estudos sobre a implicação da via de Akt e da fosforilação oxidativa mitocondrial na resistência de tumores retais a radioquimioterapia neoadjuvante

Resumo

A resistência a radioquimioterapia é um dos principais obstáculos para um desfecho favorável no tratamento do câncer. O tratamento com radioquimioterapia neoadjuvante (RQTn), entretanto, pode levar a regressão completa do tumor em uma proporção significativa de pacientes com câncer de reto (até 40%). Contudo, aproximadamente 60% dos pacientes apresentam apenas remissão parcial do tumor, ou nenhuma, após o tratamento. Na tentativa de identificar os mecanismos biológicos tumorais que possam estar relacionados à resistência a RQTn, realizamos análises de expressão gênica diferencial entre tumores de reto que apresentaram regressão total ou parcial após a nQRT, seguidas de análises de enriquecimento de vias biológicas dentre os genes diferencialmente expressos. De acordo com nossos dados preliminares, as vias de fosforilação oxidativa mitocondrial e sinalização por fosfatidilinositóis estão enriquecidas entre os genes diferencialmente expressos dos dois grupos de tumores. Genes relacionados à fosforilação oxidativa mitocondrial foram encontrados down-regulados nos tumores provenientes de pacientes que não respondem ao tratamento neoadjuvante, alguns genes da via de sinalização por fosfatidilinositóis como a fosfatidilinositol sintase e a fosfolipase C estão up-regulados e, os genes para a fosfatidilinositol 4-fosfato 5 quinase beta 1, inositol 1,3,4 trifosfato 5/6 quinase e o receptor de inositol 1,4,5 trifosfato tipo 3 (importantes na sinalização de cálcio) estão down-regulados. Ambas as vias aqui descritas já foram reportadas de forma independente como envolvidas em resistência a radioquimioterapia em tumores sólidos. No presente trabalho, propomos então: i) avaliar a participação da disfunção mitocondrial e da ativação de Akt através de análise de expressão gênica diferencial em dados de RNA-Seq antes e após do tratamento neoadjuvante, ii) avaliar a ativação de Akt por imuno-histoquímica, utilizando anticorpos para Akt fosforilada em amostras de tumores de reto provenientes de biópsias assim como em linhagens celulares de tumor de reto sensível e resistente ao tratamento neoadjuvante por immunoblot e, por último, iii) realizar testes in vitro para novos protocolos de terapias considerando inibidores de Akt como radio sensibilizador, na tentativa de melhorar a eficácia do tratamento neoadjuvante. A caracterização dos mecanismos que levam a regulação destas vias seria de grande relevância tanto para entender os mecanismos de resistência a RQTn em câncer de reto quanto para propor novas estratégias terapêuticas. (AU)