Análise das proteínas ósseas liberadas após a aplicação de forças ortopédicas em ratos fumantes passivos.

Resumo

O hábito de fumar é bastante comum e, na maioria das vezes, inicia-se ainda na adolescência. Dentre as diversas alterações sistêmicas provocadas, o comprometimento do processo de reparo celular é de grande importância na compreensão dos movimentos dento-esqueléticos. Não existem evidências científicas que correlacionem este hábito e suas influências no tratamento ortodôntico/ortopédico, especialmente no tocante às análises celulares e moleculares. O objetivo deste estudo será avaliar o processo de remodelação óssea após instalação de forças ortopédicas em ratos fumantes. Um total de 60 ratos Wistar serão divididos em 4 grupos (n=15): controle negativo [sutura intacta, sem fumaça de cigarro (FC)], grupo experimental I (sutura intacta e com FC), grupo experimental II [expansão rápida da maxila (ERM) e sem FC] e grupo experimental III (ERM+FC). Cada grupo será subdividido em 3 períodos experimentais de avaliação (n=5) sendo os animais de cada subgrupo sacrificados após 3, 7 e 10 dias após a expansão maxilar ortopédica. Serão avaliadas as mudanças na expressão gênica e protéica de RANK, RANK-L, osteoprotegerina (OPG), osteonectina (ONC), osteocalcina (OCC), sialoproteína óssea (BSP), osteopontina (OPN) e proteína morfogenética óssea (BMP) 2. O PCR em tempo real será usado para amplificar o cDNA dos genes de estudo, cujos resultados serão analisados no Sequence Detection Software vl.3. Estes dados serão confirmados pela avaliação da expressão protéica através de Western Blotting. Os resultados do PCR em tempo real de cada gene de interesse e os valores da densidade óptica relativa das bandas imunorreativas serão agrupados de acordo com os diferentes grupos de estudo e de período experimental, e submetidos à analise de variância e comparados pelo teste t de Student. A diferença será considerada estatisticamente significante quando p<0.05. (AU)