Direcionamento do domínio III da proteína E do vírus da dengue para células dendríticas por meio de vacina de DNA.

Resumo

A dengue é uma infecção causada pelo vírus da dengue (DENV) que acomete milhões de pessoas por ano, causando sintomas como febre, diarreia, dores de cabeça e vômitos. Apesar de sua importância epidemiológica e incidência crescente, uma vacina efetiva contra o DENV ainda não foi desenvolvida. Um dos antígenos utilizados na formulação de vacinas contra o DENV é a proteína do envelope (E) viral. Esta proteína contém 3 domínios (EDI, EDII e EDIII). Vários estudos demonstraram que o EDIII possui maior potencial imunogênico por conter epítopos que induzem anticorpos neutralizantes.Entre as estratégias de vacinação disponíveis hoje, estão as vacinas de DNA. Esse tipo de vacina consiste de um plasmídeo contendo a sequência do antígeno de interesse. Uma vez injetado no organismo, o plasmídeo pode transfectar diretamente células apresentadoras de antígeno (APCs) ou outras células adjacentes. Após a síntese do gene de interesse, o produto é então apresentado via MHC classe I e II na superfície da membrana celular, dando início à resposta imune. Uma das principais desvantagens desse tipo de vacinação é a baixa imunogenicidade gerada. Visando solucionar esse problema, uma forma de aprimorar a vacina é utilizar uma estratégia que vise o direcionamento do produto gênico para células dendríticas.As células dendríticas (DCs) são as principais APCs do sistema imune. Trabalhos envolvendo o direcionamento de antígenos para estas células tem mostrado uma melhora na resposta imune gerada. O direcionamento é feito fusionando-se o antígeno a um anticorpo monoclonal que se liga ao receptor de superfície DEC205, expresso por uma subpopulação específica de DCs. No caso de vacinas de DNA, já foi demonstrado que a imunização de animais com plasmídeos codificando um gene quimérico contendo as porções variáveis das cadeias leve e pesada (single-chain variable fragmente, scFv) do anticorpo monoclonal ±DEC205 fusionadas ao antígeno são capazes de fazer o direcionamento efetivo para DCs, aprimorando a resposta imune em alguns casos.Neste projeto temos interesse em desenvolver uma vacina de DNA contendo o domínio III (EDIII) da proteína E do DENV fusionado à um scFv ±DEC205.