Mapeamento dos pontos de quebra do DNA e investigação dos mecanismos associados a rearranjos genômicos utilizando sequenciamento de nova geração.

Resumo

Rearranjos genômicos são alterações estruturais na molécula de DNA e podem ser a causa de inúmeras doenças genéticas. Esses rearranjos são decorrentes de diversos mecanismos de reparo conhecidos, tanto recorrentes como não recorrentes, ou também de um único evento molecular catastrófico. Cada mecanismo gera uma "assinatura" única nos pares de base adjuntos ao local do ponto de quebra. Para identifica-los, é necessário o sequenciamento da região envolvida. A análise dos pontos de quebra dos rearranjos genômicos pode fornecer informações importantes para uma maior compreensão da plasticidade genômica, na geração das anormalidades estruturais e consequências funcionais. Esses estudos são essenciais para o entendimento da maneira que o DNA é reparado, em quais ocasiões ocorrem, quais as consequências para saúde do indivíduo e até mesmo elucidar as diferenças cromossômicas evolutivas. No presente estudo, temos como objetivo sequenciar os pontos de quebra genômicos a fim de identificar o mecanismo formador das alterações encontradas. Para isso, sequenciaremos por métodos de nova geração (SNG, MiSeq - Illumina) os pontos de quebra do DNA em amostras provenientes de 15 pacientes com fenótipo clínico portadores de rearranjos genômicos estruturais. Esperamos encontrar elementos genômicos que nos permitam identificar os mecanismos pelos quais essas alterações foram formadas e quais as possíveis causas iniciadoras desses mecanismos, visando uma maior compreensão dos processos de reparação do genoma. (AU)