Biologia estrutural e desenvolvimento de fármacos contra a proteína NS5 do vírus Zika

Resumo

Zika virus é um membro da família dos Flavivirus, com genoma constituído por uma única fita positiva de RNA que codifica por 3 proteinas estruturais e outras 7 não estruturais. Sua ocorrência no Brasil foi relatada pela primeira vez em abril de 2015 e desde então já foram notificados 148.905 casos. Os sintomas típicos da doença são febre moderada, erupções cutâneas, artralgias, dor de cabeça e conjuntivite, semelhantes, embora menos intensos, aos sintomas do vírus da dengue. O impacto maior da epidemia decorre da ocorrência de um grande numero de casos de microcefalia em bebes e fetos de gestantes que foram infectadas com o vírus. Diante desses fatos muitos estudos vêm sendo realizados, para a busca de um possível candidato a fármaco eficaz contra o ZIKV, já que a epidemia está se espalhando não só pelo Brasil, mas também por muitos países da América do Sul e Central. Dentre as metodologias disponíveis para a seleção de novos fármacos está o planejamento baseado na estrutura do receptor (SBDD). Com base na estrutura tridimensional de proteínas-alvo validadas, este método utiliza diversas técnicas computacionais, sempre integradas com métodos experimentais de síntese e avaliação dos compostos planejados, e tem sido cada vez mais usada para o desenvolvimento de novos fármacos. A proteína não-estrutural NS5 do ZIKV contém dois domínios que desempenham funções centrais para a replicação do RNA viral na célula infectada, um domínio tipo RNA-dependente-RNA-polimerase (RdPd) e um domínio metiltransferase. O bloqueio específico de qualquer destas funções é letal para a replicação do vírus. Neste projeto é proposta a expressão, purificação e determinação da estrutura tridimensional por cristalografia de raios-X da proteína NS5 ZIKV (integral e domínios funcionais), bem como a busca por ligantes desta proteína, possíveis candidatos a fármacos, para tanto utilizando produtos naturais ou substâncias sintéticas desenvolvidas no Centro de Pesquisa e Inovação em Biodiversidade e Fármacos (CIBFar-CEPID). Uma vez que hits (moléculas com atividade promissora) são identificados, estes serão otimizados por ciclos de planejamento-síntese química-avaliação bioquímica/biológica, concentrando-se em tanto nos critérios de afinidade e especificidade para o alvo, quanto a farmacocinética e toxicologia adequada para aplicações farmacológicas. O objetivo final é conseguir pelo menos um candidato a fármaco anti-zika, em condições para entrar em estudos pré-clínicos e clínicos. (AU)