Vesículas extracelulares na comunicação inter-embrionária e materno-embrionária durante o desenvolvimento in vitro de embriões bovinos

Resumo

A implantação embrionária é um processo complexo que envolve sincronia na comunicação entre o embrião e o ambiente uterino materno. Em bovinos, estima-se que falhas na sinalização entre o concepto e a mãe são responsáveis por levar a perda de 40% das gestações. Sendo assim, a compreensão dos mecanismos envolvidos na comunicação materno-embrionária é de extrema importância. Entretanto, a maioria dos trabalhos tem focado somente em estudar esta comunicação de maneira unidirecional, sendo estes envolvendo os sinais produzidos pelo endométrio materno durante o período de receptividade embrionária. Recentemente vesículas extracelulares (VEs) contendo miRNAs, mRNAs e proteínas foram apontadas como uma nova forma de comunicação celulares pois estas vesículas são capazes de transmitir mensagens entre células e tecidos. Desta forma, acredita-se que VEs tais como: microvesículas e exossomos, possam atuar diretamente na comunicação entre blastocistos cultivados in vitro e entre o embrião e a mãe. Desta maneira, a hipótese central do presente projeto é que blastocistos bovinos produzidos in vitro por FIV e TNCS são capazes de sintetizar e liberar vesículas extracelulares que atuam de diferentes maneiras nas comunicações inter-embrionária e materno-embrionária. Para testar essa hipótese vamos desenvolver um modelo embrionário in vitro por meio da TNCS para o estudo dos processos de comunicação inter-embrionária e materno-embrionária. Para isso, será estabelecida uma linhagem celular (fibroblastos) in vitro capaz de secretar VEs marcadas com green-fluorescence protein (PalmGFP) ou td/Tomatp (PalmTomato), que será utilizada como doadora de núcleo durante a produção dos blastocistos bovinos clonados. Por meio deste modelo in vitro esperamos identificar a liberação e absorção de exossomos pelos blastocistos bovinos e também pela linhagem celular do oviduto utilizada durante o cultivo in vitro dos embriões. Certamente, este projeto é muito inovador e irá nos auxiliar na melhor compreensão dos processos envolvidos na comunicação entre os embriões e materno-embrionária, possibilitando desta forma, o melhor desenvolvimento das tecnologias reprodutivas assistidas. Além disso, compreender os mecanismos envolvidos no cross-talk entre o embrião e a mãe pode servir como modelo de estudo para humanos, uma vez que a obtenção de material para pesquisa é bastante limitada. (AU)