Elucidação das vias de sinalização celular mediadas por proteína quinase A (PKA), MAPK e cálcio durante expressão e secreção de celulases pelo fungo Trichoderma reesei

Resumo

O Brasil é um dos países com maior diversidade em termos de biomassa lignocelulósica. A produção de enzimas lignocelulolíticas por fungos filamentosos tem sido um constante objeto de estudo, principalmente porque tais enzimas são de fundamental importância em processos de geração de biocombustíveis a partir de biomassa vegetal. Entretanto, ainda não se conseguiu um microrganismo considerado altamente eficaz para a hidrólise da biomassa. Isso se deve muito a falta de um conhecimento sólido na regulação da produção dessas enzimas. Um dos principais mecanismos de regulação da síntese de proteínas se dá pela ativação de cascatas de fosforilação que acarretam na ativação de fatores de transcrição. Dessa forma, a compreensão das vias de sinalização ativadas em determinadas condições pode fornecer conhecimento que permita "engenheirar" o microrganismo de forma que este se torne um melhor produtor de enzimas lignocelulolíticas, mesmo em condições com altas concentrações de glicose em que ocorreria a repressão catabólica. Assim, são objetivos deste projeto: (1) Elucidação das vias de sinalização celular mediadas por Proteína quinase A (PKA), MAPK e cálcio, (2) identificação por fosfoproteômica de alvos potenciais de fosforilação por PKA e MAPK, (3) estudo da genômica funcional de genes que fazem parte das vias de sinalização por PKA, MAPK e transportadores de cálcio identificados em T. reesei. (4) purificar e caracterizar as vesículas secretoras de T. reesei na indução por bagaço de cana de açúcar. (5) determinar e identificar o conteúdo proteico das vesículas extracelulares de T. reesei. Ao final do projeto pretendemos contribuir para o maior entendimento da biologia desse importante fungo industrial, com vistas na produção de linhagens mutantes a fim de aumentar a produção de holocelulases e diminuir os custos de produção de coquetéis enzimáticos que ainda oneram grande parte dos produtos biotecnológicos obtidos a partir de T. reesei, principalmente na produção de bioetanol. (AU)