Influência da via de sinalização HIPPO na segregação entre a massa interna celular e o trofectoderma em embriões bovinos

Resumo

O primeiro evento de diferenciação celular em mamíferos consiste na separação entre a massa celular interna (MCI) e o trofectoderma (TE). Sabe-se em camundongos que a via de sinalização HIPPO tem papel importante no controle da expressão de genes que definem a segregação MCI/TE. Em bovinos, há indícios que os mesmos genes não participam da mesma maneira, porém a via HIPPO ainda pode estar implicada nesse evento biológico. O presente projeto visa testar a hipótese que a atividade de LATS1/2 é necessária para a diferenciação da MCI em embriões bovinos. Pretende-se eliminar LATS1/2 por uso de edição gênica por CRISPR/Cas9 em zigotos produzidos in vitro. Os embriões serão então cultivados para avaliação da taxa de formação de blastocistos, distribuição celular, expressão gênica e proteica. Espera-se inibir a formação da MCI devido ausência da sinalização da via HIPPO que seria mediada por LATS1/2. Desta maneira este projeto contribuiria com o entendimento dos mecanismos de segregação da MCI/TE, que podem ser úteis na compreensão de falhas que ocorrem nos processos de produção in vitro de embriões. (AU)