Interação hipotálamo e núcleo retrotrapezóide no controle da atividade respiratória

Resumo

O hipotálamo é uma região envolvida no funcionamento de diversos sistemas essenciais para a manutenção da vida. Uma série de trabalhos têm demonstrado que regiões hipotalâmicas, em especial o núcleo paraventricular do hipotálamo (PVH) se projeta para regiões fundamentais do controle ventilatório, como a Coluna Respiratória Ventral (CRV), o Núcleo do Trato Solitário (NTS) e o núcleo retrotrapezóide (RTN). Além disso, sabe-se que o PVH e o RTN participam da resposta do quimiorreflexo periférico, porém não está claro qual a real interação entre PVH e o RTN no controle respiratório. Diante disso, o objetivo do presente trabalho será investigar a interação entre o PVH e o RTN sobre parâmetros ventilatórios em animais sob condições basais ou durante desafios hipóxicos e hipercápnicos. Para tanto utilizaremos duas linhagens de camundongos: a) Phox2b-Cre que expressa Cre recombinase em neurônios Phox2b e b) animais controles C57B6/J. Inicialmente será injetado adenovírus CAV-2 no RTN de todos os camundongos utilizados nesse trabalho, induzindo assim a expressão de Cre recombinase nos animais Phox2b-cre, o qual irá revelar quais neurônios hipotalâmicos interagem monossinápticamente com o RTN. O próximo passo será injetar vetores virais (pAAV-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry) ou (pAAV-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-mCherry) na região do PVH, que induz seletivamente a expressão de receptor acoplado a proteína Gq ou Gi. Após alguns dias, os animais serão submetidos a registro ventilatório em caixa pletismográfica e receberão injeção de clozapina que ativará as vias das proteínas G e revelará se a ativação ou inibição da via PVH-RTN afeta os parâmetros ventilatórios sob o desafio hipercápnico ou hipóxico. Nossa hipótese é de que neurônios do PVH que se projetam para a região do RTN impactam a atividade respiratória basal e também durante desafios como a hipóxia e hipercapnia. (AU)