Prevalência de espécies bacterianas ainda não cultivadas e de espécies incomuns em indivíduos com doença periodontal crônica por meio da técnica do 16S rRNA Checkerboard DNA-DNA Hybridization

Resumo

A microbiota da periodontite crônica é complexa, consistindo normalmente de bactérias anaeróbias Gram-negativas, tais como Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola, Prevotella intermedia, Tannerella forsythia e Agregatibacter actinomycetemcomitans. Por muito tempo, a análise da microbiota bucal foi dependente das técnicas convencionais de cultura, entretanto as técnicas de diagnóstico moleculares identificaram cerca de 1200 espécies de bactérias na cavidade bucal, incluindo espécies indígenas e transitórias. De modo geral, 620 espécies são mais predominantes e cerca de 35% destas ainda não foram cultivadas. Assim sendo, novas informações sobre espécies "incomuns" ou espécies ainda não cultivadas vêem ganhando a luz do conhecimento com o avanço das técnicas moleculares e poderiam exercer um papel na etiologia das doenças periodontais. Desulfobulbus sp. R004, Deferribacteres sp. D084, Eubacterium sp BB142, Prevotella sp AH125, Megasphaera sp. CS025, TM7 sp. AH040, Selenomonas sp. CS002, Eubacterium sp. BB142, Tannerella sp. BU063 e Porphyromonas sp. BB136 são alguns exemplos de espécies ainda não cultivadas que podem estar envolvidas com a etiologia da periodontite crônica. Atopobium rimae, Campylobacter consisus, Eubacterium infirmum, Selenomonas sputigena, Solobacterium moorei e Pseudoramibacter alactolyticus são exemplos de espécies "incomuns" que poderiam ser periodontopatógenos. Porém, faltam informações em relação ao papel das mesmas no processo patológico das doenças periodontais. Assim sendo, o objetivo do presente estudo será o de avaliar a prevalência, níveis e proporção de determinadas espécies de bactérias ainda não cultivadas e de espécies "incomuns" em indivíduos com periodontite crônica. Serão selecionados 20 indivíduos com doença periodontal crônica (PC) e 20 indivíduos com saúde periodontal (SP). Os indivíduos do grupo PC receberão a terapia básica de raspagem e alisamento radicular (RAR) em 14 dias. As avaliações clínicas serão realizadas no exame inicial para ambos os grupos e repetidas após 90 e 180 dias do término da RAR no grupo PC. Amostras de biofilme subgengival serão coletadas de 9 sítios (rasos, moderados e profundos) em cada um dos voluntários e os níveis de 40 espécies bacterianas (20 sondas para espécies já cultivadas, incluído espécies "incomuns"; 19 sondas para espécies ainda não cultivadas e 1 sonda universal para o domínio bactéria) serão avaliados pela técnica do 16S rRNA Ckeckerboard DNA-DNA Hybridization. A avaliação microbiológica será realizada na consulta inicial para ambos os grupos e 90 e 180 dias pós-terapia no grupo PC. Diferenças nos parâmetros clínicos ou microbiológicos entre os 2 grupos serão avaliadas por meio do teste teste U de Mann-Whitney. Diferenças dentro do grupo PC, entre os tempos experimentais serão avaliadas utilizando-se os testes Friedman e Wilcoxon. Testes de correlação e testes de regressão logística serão realizados entre os níveis, proporções e prevalência das espécies estudadas e os parâmetros clínicos da doença periodontal. A significância estatística será estabelecida em 5%. (AU)