Estudo do comportamento de células indiferenciadas da polpa na presença de meio condicionado de células odontoblásticas.

Resumo

O extraordinário potencial regenerativo do complexo dentino-pulpar enfatiza a importância da caracterização dos processos celulares e moleculares envolvidos na regeneração dentinária. Atualmente acredita-se que células indiferenciadas da polpa são as responsáveis por essa regeneração, tornando a terapia celular uma promessa na reconstrução e substituição de elementos dentários. O objetivo deste estudo é avaliar o efeito do meio condicionado de células diferenciadas odontoblásticas sobre células indiferenciadas da polpa dental de camundongos. O meio condicionado será obtido a partir de cultura de uma linhagem de células odontoblásticas de camundongos com duração de 24, 48 e 72 horas. Este meio será coletado, filtrado e armazenado para posteriormente ser adicionado ao meio de cultura de células indiferenciadas da polpa de camundongos. As culturas de células indiferenciadas serão divididas em quatro grupos experimentais: 1) controle (sem adição de meio condicionado); 2) adição de 50% de meio condicionado por 24 horas; 3) adição de 50% de meio condicionado por 48 horas e 4) adição de 50% de meio condicionado por 72 horas. Após 3, 7, 10 e 14 dias de cultura, serão analisados os seguintes parâmetros: proliferação e viabilidade celular, quantidade de proteína total, atividade de fosfatase alcalina, detecção e quantificação de nódulos mineralizados, quantificação de VEGF no sobrenadante das células indiferenciadas e expressão de genes relacionados à atividade odontoblástica através de PCR RealTime.