Construção e caracterização de scFv anti-FGF2 a partir do hibridoma secretor do MAb 3F12E7

Resumo

O melanoma é uma desordem potencialmente fatal e novas opções para seu tratamento têm sido estudadas. Dentre elas, as que visam impedir crescimento de vasos que nutrem o tumor. Associada a terapias citotóxicas convencionais, a terapia anti-angiogênica já mostrou seu potencial e teve seu uso aprovado no tratamento de alguns tumores. Dentre as drogas anti-angiogênicas, estão os anticorpos monoclonais contra fatores angiogênicos. Um trabalho em fase de conclusão, desenvolvido por nosso grupo (processo FAPESP 09/18631-1), mostra com sucesso a atividade inibidora do crescimento e de formação de metástase de melanoma de um anticorpo monoclonal (MAb) contra o fator de crescimento de fibroblasto-2 (FGF-2) (MAb 3F12E7). O MAb 3F12E7 foi produzido por nosso grupo a partir da imunização com o gene do FGF-2 humano. Como continuidade desse trabalho, propomos a construção do fragmento variável de cadeia única scFv (single chain variable fragment) a partir do hibridoma secretor desse MAb. Os anticorpos na forma de scFv são proteínas construídas por engenharia genética que, por sua pequena dimensão, infiltram mais facilmente em massas tumorais sólidas. Além dessa vantagem em relação ao uso do anticorpo completo, as scFv, quando injetadas em humanos, não provocam resposta imunológica contra os marcadores iso e alotípicos, presentes na porção constante das cadeias que formam as imunoglobulinas. No presente projeto, propomos a construção e caracterização da scFv anti-FGF-2 3F12E7 para posterior avaliação de sua eficiência em terapia celular e gênica. (AU)