Avaliação citotóxica e genotóxica de osteoblastos de recém-nascidos de ratas etilistas

Resumo

O álcool apresenta efeito teratogênico e o seu consumo durante a gestação pode causar várias alterações no feto, inclusive interferir no seu desenvolvimento ósseo. O objetivo deste trabalho é avaliar o efeito citotóxico e genotóxico do consumo crônico de álcool a 20% em osteoblastos de ratos recém-nascidos, cujas mães serão tratadas com álcool antes e durante a gestação. Para tanto serão utilizadas 30 ratas prenhas divididas em grupos conforme a dieta: 10 tratadas com álcool a 20%; 10 pertencentes ao grupo isocalórico, correspondente às calorias ingeridas pelo grupo do álcool; e 10 animais tratados com água e ração à vontade. As ratas serão condicionadas ao alcoolismo, e para isso, as mesmas serão tratadas a partir de um mês e meio de idade. Inicialmente passarão por um período de adaptação de quatro semanas e depois serão tratadas diariamente com 20% de solução alcoólica até os quatro meses e meio de idade. Após esse período, elas serão acasaladas e tratadas por todo período gestacional. Aos três dias de vida, os recém-nascidos serão eutanasiados para remoção da calvária e isolamento das células por meio de digestão enzimática sequencial, sendo estas cultivadas por períodos de até 14 dias. Nas placas de cultura serão realizados os testes para avaliar o efeito citotóxico e genotóxico do álcool baseado na presença de micronúcleos, caracterização da morte celular, teste cometa, avaliação do cariótipo, PCR, expressão de proteínas de adesão e microscopia de varredura. Os dados numéricos serão submetidos à análise estatística utilizando-se o teste ANOVA, com nível de significância de 5%. (AU)