Clonagem, purificação e caracterização de proteínas antigênicas recombinantes obtidas de Mycoplasma agalactiae

Resumo

Agalaxia Contagiosa (AC) afeta pequenos ruminantes, é classificada pela World Organization for Animal Health (OIE) doença de notificação obrigatória, por ter impacto econômico significativo sobre a produção de ovinos e caprinos. Causa redução ou supressão da produção de leite, febre, septicemia, mastite, aborto e artrite severa, podendo causar morte rapidamente. AC é uma síndrome multe etiológica, no qual quatro microrganismos foram identificados como causadores da doença, dentre eles: Mycoplasma agalactiae, considerado historicamente o principal; Mycoplasma mycoides subsp. mycoides Large Colony; Mycoplasma capricolum subsp. capricolum; e M. putrefaciens. Apesar do progresso nos estudos sobre métodos terapêuticos e de prevenção, estratégias ainda permanecem ineficientes no controle da AC. Dessa forma, a geração de nova alternativa que proporcione melhor proteção contra infecções por M. agalactiae são necessárias. Com isso, este projeto visa a identificação, purificação e caracterização de proteínas antigênicas de M. agalactiae, com potencial vacinal. Para tanto, sequências de DNA codificantes (CDS) de proteínas de M. agalactiae serão analisadas por meio de técnicas de bioinformática (SignalP versão 4.1, TMHMM versão 2.0, IEDB Analysis Resource). Serão selecionadas CDS de proteínas de superfície, proteínas secretadas ou proteínas relacionadas com a patogênese que possuem epítopo com predição para anticorpos. As proteínas antigênicas de M. agalactiae serão clonadas e expressas em Escherichia coli como sistema heterólogo. Após clonagem e purificação para obtenção das proteínas selecionadas, estas serão avaliadas quanto a sua antigenicidade utilizando soro de caprinos naturalmente infectados com M. agalactiae. (AU)