Quantificação e atividade enzimática da 5-enolpiruvil-shiquimato-3-fosfato sintase em plantas daninhas resistentes ao glyphosate

Resumo

A resistência a herbicidas (RH) é um fato consumado no Brasil desde a década de 1990. A RH pode ser conferida por mecanismos bioquímicos, fisiológicos ou moleculares não relacionados ao sitio de ação (non-target site - NTS) ou relacionados ao sitio de ação (target-site - TS). Confirmar a RH é relativamente fácil mediante ensaios de dose-resposta; porém, determinar qual mecanismo (s) está envolvido é complexo e as vezes caro, pois frequentemente requer equipamentos sofisticados ou kits específicos. Portanto, realizar uma caracterização completa dos mecanismos resulta, na maioria das vezes, inviável: no entanto, também não se pode desconsiderar arbitrariamente a participação ou não de nenhum deles. Ensaios como a quantificação da concentração inicial (atividade basal) da enzima alvo, e sua velocidade de inibição (atividade enzimática) pelo herbicida, podem ajudar a deduzir qual é o principal grupo de mecanismos (TRS ou NTSR) envolvido num caso de RH. Se as atividades basal e enzimática são semelhantes entre plantas resistentes e susceptíveis, permite desconsiderar a participação de mecanismos TSR, ou seja, as pesquisas devem ser focadas na caracterização dos mecanismos NTSR. Diferenças na atividade basal ou enzimática confirma a participação de mecanismos TSR, pelo que as pesquisas devem estar focadas em caracteriza-los. Neste projeto se determinara a atividade basal e enzimática da 5-enolpiruvil-shiquimato-3-fosfato sintase (enzima alvo do glyphosate), isolada de populações de plantas daninhas coletadas em citros e outras culturas do estado de São Paulo, previamente confirmadas com resistência a este herbicida. Estes resultados permitirão discriminar quais mecanismos, TSR ou NTSR, deverão ser caracterizados em cada população resistente.